中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2010年
9期
1764-1768
,共5页
张菊%关恒云%张鹏举%陈蔚文%陈兆波%倪娜娜%朱闻捷%王坤%胡小燕%姜安丽
張菊%關恆雲%張鵬舉%陳蔚文%陳兆波%倪娜娜%硃聞捷%王坤%鬍小燕%薑安麗
장국%관항운%장붕거%진위문%진조파%예나나%주문첩%왕곤%호소연%강안려
同源盒基因NKX3.1%PC3细胞%基因,Dicer1
同源盒基因NKX3.1%PC3細胞%基因,Dicer1
동원합기인NKX3.1%PC3세포%기인,Dicer1
目的: 研究前列腺特异转录因子NKX3.1对Dicer1基因表达的影响.方法: 转染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3细胞,通过G418筛选,有限稀释法克隆培养获得NKX3.1稳定转染的PC3细胞-PC3(+);采用基因芯片检测NKX3.1对前列腺癌PC3细胞基因组表达谱的影响.进一步应用RT-PCR、Western blotting进行验证.为进一步检测Dicer1表达增高、促进microRNA的成熟作用,构建了microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞,通过报道基因检测成熟microRNA let-7a-1对其靶序列的作用.结果: 基因组芯片显示,NKX3.1稳定表达的PC3(+)细胞中,Dicer1表达明显高于PC3细胞.RT-PCR、Western blotting结果验证PC3(+)细胞中Dicer1 mRNA和蛋白质的表达水平均高于PC3细胞.microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞后,报告基因检测,PC3(+)细胞中荧光素酶活性明显低于PC3细胞.结论: NKX3.1可上调前列腺癌PC3细胞中Dicer1的表达,促进microRNA的成熟及作用.
目的: 研究前列腺特異轉錄因子NKX3.1對Dicer1基因錶達的影響.方法: 轉染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3細胞,通過G418篩選,有限稀釋法剋隆培養穫得NKX3.1穩定轉染的PC3細胞-PC3(+);採用基因芯片檢測NKX3.1對前列腺癌PC3細胞基因組錶達譜的影響.進一步應用RT-PCR、Western blotting進行驗證.為進一步檢測Dicer1錶達增高、促進microRNA的成熟作用,構建瞭microRNA let-7a-1靶序列-報道基因融閤質粒,轉染PC3細胞和PC3(+)細胞,通過報道基因檢測成熟microRNA let-7a-1對其靶序列的作用.結果: 基因組芯片顯示,NKX3.1穩定錶達的PC3(+)細胞中,Dicer1錶達明顯高于PC3細胞.RT-PCR、Western blotting結果驗證PC3(+)細胞中Dicer1 mRNA和蛋白質的錶達水平均高于PC3細胞.microRNA let-7a-1靶序列-報道基因融閤質粒,轉染PC3細胞和PC3(+)細胞後,報告基因檢測,PC3(+)細胞中熒光素酶活性明顯低于PC3細胞.結論: NKX3.1可上調前列腺癌PC3細胞中Dicer1的錶達,促進microRNA的成熟及作用.
목적: 연구전렬선특이전록인자NKX3.1대Dicer1기인표체적영향.방법: 전염pcDNA3.1-NKX3.1지전렬선암PC3세포,통과G418사선,유한희석법극륭배양획득NKX3.1은정전염적PC3세포-PC3(+);채용기인심편검측NKX3.1대전렬선암PC3세포기인조표체보적영향.진일보응용RT-PCR、Western blotting진행험증.위진일보검측Dicer1표체증고、촉진microRNA적성숙작용,구건료microRNA let-7a-1파서렬-보도기인융합질립,전염PC3세포화PC3(+)세포,통과보도기인검측성숙microRNA let-7a-1대기파서렬적작용.결과: 기인조심편현시,NKX3.1은정표체적PC3(+)세포중,Dicer1표체명현고우PC3세포.RT-PCR、Western blotting결과험증PC3(+)세포중Dicer1 mRNA화단백질적표체수평균고우PC3세포.microRNA let-7a-1파서렬-보도기인융합질립,전염PC3세포화PC3(+)세포후,보고기인검측,PC3(+)세포중형광소매활성명현저우PC3세포.결론: NKX3.1가상조전렬선암PC3세포중Dicer1적표체,촉진microRNA적성숙급작용.
