CAJ | 학술논문

本研究旨在筛选获取优质ICM集落的实验方法.以昆明系小鼠为实验动物,采集3.5、4d和4.5 d的胚胎,分别移入DMEM培养液、DMEM+白血病抑制因子(LIF)和小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系中进行培养,观察比较内细胞团( ICM)从透明带中孵出的时间、孵化囊胚贴壁情况以及ICM集落形成情况.结果表明:妊娠3.5 d的胚胎61％为桑椹胚,需要经过4～5 d的体外培养才能形成ICM集落；妊娠4d的扩张囊胚经过3～4 d的共培养后形成ICM集落；妊娠4.5 d的孵化囊胚经过1～2 d的共培养即可形成ICM集落；ICM形成率以妊娠4.5 d的胚胎最高,显著高于妊娠4d和3.5 d的胚胎(P＜0.01),但妊娠4.5d冲出孵化囊胚数量显著降低(P＜0.01)；小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系优于DMEM和DMEM+LIF培养液.因此,采集妊娠4d的昆明小鼠胚胎,选择小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系,在体外培养3～4 d,能够有效分离培养出可用于胚胎干细胞研究的优质ICM.
본연구지재사선획취우질ICM집락적실험방법.이곤명계소서위실험동물,채집3.5、4d화4.5 d적배태,분별이입DMEM배양액、DMEM+백혈병억제인자(LIF)화소서태인성섬유세포공배양체계중진행배양,관찰비교내세포단( ICM)종투명대중부출적시간、부화낭배첩벽정황이급ICM집락형성정황.결과표명:임신3.5 d적배태61％위상심배,수요경과4～5 d적체외배양재능형성ICM집락；임신4d적확장낭배경과3～4 d적공배양후형성ICM집락；임신4.5 d적부화낭배경과1～2 d적공배양즉가형성ICM집락；ICM형성솔이임신4.5 d적배태최고,현저고우임신4d화3.5 d적배태(P＜0.01),단임신4.5d충출부화낭배수량현저강저(P＜0.01)；소서태인성섬유세포공배양체계우우DMEM화DMEM+LIF배양액.인차,채집임신4d적곤명소서배태,선택소서태인성섬유세포공배양체계,재체외배양3～4 d,능구유효분리배양출가용우배태간세포연구적우질ICM.