E2F-1启动子调控下肿瘤靶向性作用的研究
E2F-1계동자조공하종류파향성작용적연구
Gene therapy targeting for carcinoma regulated by E2F-1 promoter
  • 万方数据
    中华外科杂志 중화외과잡지
    CHINESE JOURNAL OF SURGERY
    2006年 23期 1636-1639 ,共4页

    张学文%孟子辉%赵吉生%张丹%谢英俊%高硕辉%王春艳

    장학문%맹자휘%조길생%장단%사영준%고석휘%왕춘염

    基因%治疗%E2F-1启动子%重组腺病毒%靶向性 基因%治療%E2F-1啟動子%重組腺病毒%靶嚮性
    기인%치료%E2F-1계동자%중조선병독%파향성
    目的 研究携带组织特异性E2F-1启动子的重组腺病毒载体的肿瘤细胞靶向性作用.方法 利用AdEasy-1系统,构建含有E2F-1启动子的重组腺病毒并对重组病毒中E2F-1启动子基因进行PCR及测序鉴定.将分别携带E2F-1启动子和CMV启动子并且可以表达绿色荧光蛋白报告基因GFP基因的重组腺病毒分别转染LS174T和H292细胞,观察GFP基因表达情况;以携带肿瘤杀伤基因vpr基因的靶向性重组腺病毒rvAdE2F-1/vpr分别转染人二倍体细胞L-02、H292和肿瘤细胞SMMC-7721、LS174T,MTT法检测rvAdE2F-1/vpr对不同细胞的抑制增殖的作用;用蛋白免疫印迹的方法检测肿瘤细胞和二倍体细胞中靶蛋白E2F蛋白的表达.结果 在相同的培养条件下,E2F-1启动子可使下游的GFP基因在肿瘤细胞LS174T中大量表达而在二倍体细胞H292中微量表达,CMV启动子下游的GFP基因表达量则无明显差异;且在LS174T细胞中两种启动子转录活性相似(P＞0.05);E2F-1启动子调控下vpr基因的表达可以选择性的抑制肿瘤细胞增殖而对二倍体细胞无抑制作用;E2F-1蛋白在肿瘤组织中高表达而在正常组织中的表达不能用Western Blot检测到.结论 以E2F-1为启动子的重组腺病毒载体具有肿瘤细胞靶向性,并且有足够的启动效率调控杀伤基因作用于肿瘤细胞,因此是一个具有应用价值的靶向治疗体系.
    목적 연구휴대조직특이성E2F-1계동자적중조선병독재체적종류세포파향성작용.방법 이용AdEasy-1계통,구건함유E2F-1계동자적중조선병독병대중조병독중E2F-1계동자기인진행PCR급측서감정.장분별휴대E2F-1계동자화CMV계동자병차가이표체록색형광단백보고기인GFP기인적중조선병독분별전염LS174T화H292세포,관찰GFP기인표체정황;이휴대종류살상기인vpr기인적파향성중조선병독rvAdE2F-1/vpr분별전염인이배체세포L-02、H292화종류세포SMMC-7721、LS174T,MTT법검측rvAdE2F-1/vpr대불동세포적억제증식적작용;용단백면역인적적방법검측종류세포화이배체세포중파단백E2F단백적표체.결과 재상동적배양조건하,E2F-1계동자가사하유적GFP기인재종류세포LS174T중대량표체이재이배체세포H292중미량표체,CMV계동자하유적GFP기인표체량칙무명현차이;차재LS174T세포중량충계동자전록활성상사(P＞0.05);E2F-1계동자조공하vpr기인적표체가이선택성적억제종류세포증식이대이배체세포무억제작용;E2F-1단백재종류조직중고표체이재정상조직중적표체불능용Western Blot검측도.결론 이E2F-1위계동자적중조선병독재체구유종류세포파향성,병차유족구적계동효솔조공살상기인작용우종류세포,인차시일개구유응용개치적파향치료체계.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문