中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2007年
2期
86-91
,共6页
陈婷飞%周继勇%陈庆新%商绍彬
陳婷飛%週繼勇%陳慶新%商紹彬
진정비%주계용%진경신%상소빈
猪圆环病毒2型%分子克隆%感染性分析
豬圓環病毒2型%分子剋隆%感染性分析
저원배병독2형%분자극륭%감염성분석
通过PCR扩增猪圆环病毒2型HZ0201株的全长基因组,克隆到pBluescript SK+载体SacⅡ位点;同时以SacⅡ切出PCV2全长DNA,并进行自身环化,分别构建PCV2全长基因组重组质粒和首尾相接的环化DNA.利用脂质体分别将PCV2重组质粒和环化DNA转染PK-15和Vero细胞,免疫组织化学试验(IHC)结果显示二者均检出PCV2阳性抗原.其中PCV2环化DNA转染细胞的阳性率显著高于PCV2重组质粒.将转染细胞进行连续8次传代,以IHC对每代病毒检测表明,PCV2分子克隆在PK-15细胞中形成的病毒能稳定感染,并且滴度逐步增加;而在Vero细胞上复制能力不强,传到第四代即不能检出病毒.
通過PCR擴增豬圓環病毒2型HZ0201株的全長基因組,剋隆到pBluescript SK+載體SacⅡ位點;同時以SacⅡ切齣PCV2全長DNA,併進行自身環化,分彆構建PCV2全長基因組重組質粒和首尾相接的環化DNA.利用脂質體分彆將PCV2重組質粒和環化DNA轉染PK-15和Vero細胞,免疫組織化學試驗(IHC)結果顯示二者均檢齣PCV2暘性抗原.其中PCV2環化DNA轉染細胞的暘性率顯著高于PCV2重組質粒.將轉染細胞進行連續8次傳代,以IHC對每代病毒檢測錶明,PCV2分子剋隆在PK-15細胞中形成的病毒能穩定感染,併且滴度逐步增加;而在Vero細胞上複製能力不彊,傳到第四代即不能檢齣病毒.
통과PCR확증저원배병독2형HZ0201주적전장기인조,극륭도pBluescript SK+재체SacⅡ위점;동시이SacⅡ절출PCV2전장DNA,병진행자신배화,분별구건PCV2전장기인조중조질립화수미상접적배화DNA.이용지질체분별장PCV2중조질립화배화DNA전염PK-15화Vero세포,면역조직화학시험(IHC)결과현시이자균검출PCV2양성항원.기중PCV2배화DNA전염세포적양성솔현저고우PCV2중조질립.장전염세포진행련속8차전대,이IHC대매대병독검측표명,PCV2분자극륭재PK-15세포중형성적병독능은정감염,병차적도축보증가;이재Vero세포상복제능력불강,전도제사대즉불능검출병독.
