华南理工大学学报(自然科学版)
華南理工大學學報(自然科學版)
화남리공대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTH CHINA UNIVERSITY OF TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
9期
142-146
,共5页
叠氮溴化丙锭%脱氧核糖核酸%聚合酶链反应%活细胞检测
疊氮溴化丙錠%脫氧覈糖覈痠%聚閤酶鏈反應%活細胞檢測
첩담추화병정%탈양핵당핵산%취합매련반응%활세포검측
基于PCR的分子生物技术在检测过程中不能有效区分样品中细菌的死活状态,这会导致对细菌数量的错误估计.文中用叠氮溴化丙锭(PMA)对样品基因组提取进行前处理,使PMA与样品中死细胞的DNA分子共价交联,并抑制该DNA分子的PCR扩增. 结果表明:当样品中PMA质量浓度大于3μg/mL、曝光时间大于3min 时,PMA可抑制细胞膜破裂的E.coli死细胞DNA的PCR扩增;PMA质量浓度高于50μg/mL时对活细胞DNA的PCR扩增有一定影响;当浊度小于10NTU时,PMA能有效地抑制死细胞DNA的PCR扩增,而当浊度大于100NTU时,PMA失去效果.
基于PCR的分子生物技術在檢測過程中不能有效區分樣品中細菌的死活狀態,這會導緻對細菌數量的錯誤估計.文中用疊氮溴化丙錠(PMA)對樣品基因組提取進行前處理,使PMA與樣品中死細胞的DNA分子共價交聯,併抑製該DNA分子的PCR擴增. 結果錶明:噹樣品中PMA質量濃度大于3μg/mL、曝光時間大于3min 時,PMA可抑製細胞膜破裂的E.coli死細胞DNA的PCR擴增;PMA質量濃度高于50μg/mL時對活細胞DNA的PCR擴增有一定影響;噹濁度小于10NTU時,PMA能有效地抑製死細胞DNA的PCR擴增,而噹濁度大于100NTU時,PMA失去效果.
기우PCR적분자생물기술재검측과정중불능유효구분양품중세균적사활상태,저회도치대세균수량적착오고계.문중용첩담추화병정(PMA)대양품기인조제취진행전처리,사PMA여양품중사세포적DNA분자공개교련,병억제해DNA분자적PCR확증. 결과표명:당양품중PMA질량농도대우3μg/mL、폭광시간대우3min 시,PMA가억제세포막파렬적E.coli사세포DNA적PCR확증;PMA질량농도고우50μg/mL시대활세포DNA적PCR확증유일정영향;당탁도소우10NTU시,PMA능유효지억제사세포DNA적PCR확증,이당탁도대우100NTU시,PMA실거효과.