外科理论与实践
外科理論與實踐
외과이론여실천
JOURNAL OF SURGERY CONCEPTS & PRACTICE
2011年
6期
562-567
,共6页
张保贵%刘炳亚%燕敏%陈雪华%俞焙秦%朱正纲
張保貴%劉炳亞%燕敏%陳雪華%俞焙秦%硃正綱
장보귀%류병아%연민%진설화%유배진%주정강
miR-21%胃癌%生物学行为%PTEN
miR-21%胃癌%生物學行為%PTEN
miR-21%위암%생물학행위%PTEN
目的:探讨抑制MicroRNA 21 (miR-21)的表达对胃癌细胞的生物学行为及PTEN表达的影响,并分析miR-21参与肿瘤发生、发展的可能机制.方法:应用细胞瞬转的方法将miR-21 inhibitor转染课题组前期试验证实的miR-21高表达胃癌细胞株,应用细胞增殖试验(CCK8方法)、流式细胞技术(Annexin-Ⅴ标记)、Transwell试验检测抑制胃癌细胞株中miR-21表达后,对其细胞增殖、凋亡、周期、迁移的影响;并用Western印迹技术和双荧光素酶报告载体技术检测下调miR-21后,胃癌细胞株PTEN表达的变化.结果:体外增殖试验显示,下调miR-21后对胃癌细胞株的增殖抑制作用明显(P<0.05);体外凋亡试验显示,下调miR-21能增加胃癌细胞株的凋亡(P<0.05);在整个周期中以G1/S期为主;Transwell试验证实miR-21下调后,胃癌细胞株迁移能力明显下降(P<0.05);Western印迹试验显示,抑制miR-21表达后胃癌细胞株PTEN蛋白表达明显增加,荧光素酶相对活性明显增加(P<0.05).结论:下调miR-21的表达对胃癌细胞株的增殖有明显的抑制作用,且促进其凋亡,能降低其体外迁移能力;下调miR-21后,PTEN活性明显增加;PTEN可能是miR-21参与胃癌发生、发展的靶标之一.
目的:探討抑製MicroRNA 21 (miR-21)的錶達對胃癌細胞的生物學行為及PTEN錶達的影響,併分析miR-21參與腫瘤髮生、髮展的可能機製.方法:應用細胞瞬轉的方法將miR-21 inhibitor轉染課題組前期試驗證實的miR-21高錶達胃癌細胞株,應用細胞增殖試驗(CCK8方法)、流式細胞技術(Annexin-Ⅴ標記)、Transwell試驗檢測抑製胃癌細胞株中miR-21錶達後,對其細胞增殖、凋亡、週期、遷移的影響;併用Western印跡技術和雙熒光素酶報告載體技術檢測下調miR-21後,胃癌細胞株PTEN錶達的變化.結果:體外增殖試驗顯示,下調miR-21後對胃癌細胞株的增殖抑製作用明顯(P<0.05);體外凋亡試驗顯示,下調miR-21能增加胃癌細胞株的凋亡(P<0.05);在整箇週期中以G1/S期為主;Transwell試驗證實miR-21下調後,胃癌細胞株遷移能力明顯下降(P<0.05);Western印跡試驗顯示,抑製miR-21錶達後胃癌細胞株PTEN蛋白錶達明顯增加,熒光素酶相對活性明顯增加(P<0.05).結論:下調miR-21的錶達對胃癌細胞株的增殖有明顯的抑製作用,且促進其凋亡,能降低其體外遷移能力;下調miR-21後,PTEN活性明顯增加;PTEN可能是miR-21參與胃癌髮生、髮展的靶標之一.
목적:탐토억제MicroRNA 21 (miR-21)적표체대위암세포적생물학행위급PTEN표체적영향,병분석miR-21삼여종류발생、발전적가능궤제.방법:응용세포순전적방법장miR-21 inhibitor전염과제조전기시험증실적miR-21고표체위암세포주,응용세포증식시험(CCK8방법)、류식세포기술(Annexin-Ⅴ표기)、Transwell시험검측억제위암세포주중miR-21표체후,대기세포증식、조망、주기、천이적영향;병용Western인적기술화쌍형광소매보고재체기술검측하조miR-21후,위암세포주PTEN표체적변화.결과:체외증식시험현시,하조miR-21후대위암세포주적증식억제작용명현(P<0.05);체외조망시험현시,하조miR-21능증가위암세포주적조망(P<0.05);재정개주기중이G1/S기위주;Transwell시험증실miR-21하조후,위암세포주천이능력명현하강(P<0.05);Western인적시험현시,억제miR-21표체후위암세포주PTEN단백표체명현증가,형광소매상대활성명현증가(P<0.05).결론:하조miR-21적표체대위암세포주적증식유명현적억제작용,차촉진기조망,능강저기체외천이능력;하조miR-21후,PTEN활성명현증가;PTEN가능시miR-21삼여위암발생、발전적파표지일.