CAJ | 학술논문

目的探讨LRP15基因在K562细胞中对紫外线诱导的DNA损伤的修复作用,以进一步研究该基因的功能.方法利用真核表达质粒pcDNA3.1构建LRP15基因开放阅读框架(ORF)序列的正义及反义重组质粒;两种质粒经阳性脂质体介导法分别转染K562细胞,G418筛选阳性克隆;采用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术观察两组细胞对紫外线诱导的DNA损伤的修复作用的差异.结果PCR鉴定证实,正义及反义重组质粒中LRP15基因ORF序列均按预定方向正确插入;SCGE实验表明,经紫外线照射后两组细胞的DNA基础损伤无明显差异(P=0.156).但经45及90 min修复后实验组细胞的DNA迁移长度明显小于对照细胞(P＜0.001).结论成功构建LRP15基因的正义及反义真核表达质粒;LRP15基因对紫外线诱导的DNA损伤具有修复作用,可能是一个DNA修复基因.
목적탐토LRP15기인재K562세포중대자외선유도적DNA손상적수복작용,이진일보연구해기인적공능.방법이용진핵표체질립pcDNA3.1구건LRP15기인개방열독광가(ORF)서렬적정의급반의중조질립;량충질립경양성지질체개도법분별전염K562세포,G418사선양성극륭;채용단세포응효전영(SCGE)기술관찰량조세포대자외선유도적DNA손상적수복작용적차이.결과PCR감정증실,정의급반의중조질립중LRP15기인ORF서렬균안예정방향정학삽입;SCGE실험표명,경자외선조사후량조세포적DNA기출손상무명현차이(P=0.156).단경45급90 min수복후실험조세포적DNA천이장도명현소우대조세포(P＜0.001).결론성공구건LRP15기인적정의급반의진핵표체질립;LRP15기인대자외선유도적DNA손상구유수복작용,가능시일개DNA수복기인.