蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2003年
3期
241-245
,共5页
林旭瑷%李卫国%陈寅%易咏竹%张志芳%何家禄
林旭璦%李衛國%陳寅%易詠竹%張誌芳%何傢祿
림욱애%리위국%진인%역영죽%장지방%하가록
杆状病毒%半胱氨酸蛋白酶%家蚕生物反应器%表达
桿狀病毒%半胱氨痠蛋白酶%傢蠶生物反應器%錶達
간상병독%반광안산단백매%가잠생물반응기%표체
为了探讨杆状病毒的致病机理、改善杆状病毒表达系统的表达效率,将来源于家蚕核型多角体病毒ZJ8株的半胱氨酸蛋白酶(cystenine protease,CP)基因克隆到转移载体pVL 1393上,获得重组转移载体pVL-cp,与线性化的Bm-BacPAK6病毒DNA共转染家蚕Bm-5贴壁细胞.通过蓝白斑筛选、纯化后得到的重组病毒经PCR鉴定证明,cp基因已被正确导入,注射感染家蚕5龄幼虫120 h后表达产物活性达到最高.对表达产物进行SDS-PAGE及酶活力分析,检测到半胱氨酸蛋白酶在家蚕生物反应器中的表达,其表达量约为1 600 U/mL.
為瞭探討桿狀病毒的緻病機理、改善桿狀病毒錶達繫統的錶達效率,將來源于傢蠶覈型多角體病毒ZJ8株的半胱氨痠蛋白酶(cystenine protease,CP)基因剋隆到轉移載體pVL 1393上,穫得重組轉移載體pVL-cp,與線性化的Bm-BacPAK6病毒DNA共轉染傢蠶Bm-5貼壁細胞.通過藍白斑篩選、純化後得到的重組病毒經PCR鑒定證明,cp基因已被正確導入,註射感染傢蠶5齡幼蟲120 h後錶達產物活性達到最高.對錶達產物進行SDS-PAGE及酶活力分析,檢測到半胱氨痠蛋白酶在傢蠶生物反應器中的錶達,其錶達量約為1 600 U/mL.
위료탐토간상병독적치병궤리、개선간상병독표체계통적표체효솔,장래원우가잠핵형다각체병독ZJ8주적반광안산단백매(cystenine protease,CP)기인극륭도전이재체pVL 1393상,획득중조전이재체pVL-cp,여선성화적Bm-BacPAK6병독DNA공전염가잠Bm-5첩벽세포.통과람백반사선、순화후득도적중조병독경PCR감정증명,cp기인이피정학도입,주사감염가잠5령유충120 h후표체산물활성체도최고.대표체산물진행SDS-PAGE급매활력분석,검측도반광안산단백매재가잠생물반응기중적표체,기표체량약위1 600 U/mL.
