CAJ | 학술논문

为评估HA基因密码子优化及不同表达载体对H5亚型禽流感DNA疫苗免疫效果的影响,pCIHA5、pCAGGHA5、pCIoptiHA5和pCAGGoptiHA5分别以100和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后分别用100 LD50的高致病力禽流感病毒(HPAIV)A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]鼻腔途径进行攻击,观察发病与死亡情况,分别于攻毒后第3、5和7无采集喉头及泄殖腔拭子进行病毒分离、滴定检测排毒情况,同时检测免疫后、攻毒前及攻毒后血清HI抗体、AGP抗体的动态变化,对4种疫苗单次免疫的免疫保护效果进行比较评估.结果表明,100μg剂量组中,pCAGGoptiHA5和pCAGGHA5均可对免疫鸡形成100%完全保护(不发病、不致死和不排毒),pCIoptHA5(75%)和pCIHA5(50%)仅可形成部分免疫保护;10μg剂量免疫组中,pCAGGoptiHA5和pCAGGHA5可对免疫鸡形成100%的保护(不发病和不致死),pCIoptiHA5可形成对免疫鸡的部分免疫保护(75%),而pCIHA5则基本不能形成免疫保护.结果表明,HA基因密码子的优化以及鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果同时证明,通过密码子和载体的优化,可使H5亚型禽流感DNA疫苗有效免疫保护剂量降低至10μg,其推广应用已具备充分的经济可行性.pCAGGoptiHA5作为免疫效果良好、成本低廉的优化DNA疫苗,有望成为预防H5亚型高致病力禽流感的高效、安全新型基因工程疫苗.
위평고HA기인밀마자우화급불동표체재체대H5아형금류감DNA역묘면역효과적영향,pCIHA5、pCAGGHA5、pCIoptiHA5화pCAGGoptiHA5분별이100화10μg제량일차면역3주령SPF계,4주후분별용100 LD50적고치병력금류감병독(HPAIV)A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]비강도경진행공격,관찰발병여사망정황,분별우공독후제3、5화7무채집후두급설식강식자진행병독분리、적정검측배독정황,동시검측면역후、공독전급공독후혈청HI항체、AGP항체적동태변화,대4충역묘단차면역적면역보호효과진행비교평고.결과표명,100μg제량조중,pCAGGoptiHA5화pCAGGHA5균가대면역계형성100%완전보호(불발병、불치사화불배독),pCIoptHA5(75%)화pCIHA5(50%)부가형성부분면역보호;10μg제량면역조중,pCAGGoptiHA5화pCAGGHA5가대면역계형성100%적보호(불발병화불치사),pCIoptiHA5가형성대면역계적부분면역보호(75%),이pCIHA5칙기본불능형성면역보호.결과표명,HA기인밀마자적우화이급계β-actin계동자표체재체pCAGGS가현저제고H5아형금류감DNA역묘유도적보호성항체면역반응수평,증강면역보호효과동시증명,통과밀마자화재체적우화,가사H5아형금류감DNA역묘유효면역보호제량강저지10μg,기추엄응용이구비충분적경제가행성.pCAGGoptiHA5작위면역효과량호、성본저렴적우화DNA역묘,유망성위예방H5아형고치병력금류감적고효、안전신형기인공정역묘.