抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定
항전철단백수체단련항체적표체、순화급활성측정
Expression, Purification and Activity Analysis of Antihuman Transferrin Receptor ScFv
  • 万方数据
    生物工程学报 생물공정학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
    2006年 3期 488-491 ,共4页

    赵莉霞%颜冰%许龙%蒋世卫%张莹莹%杨志新%周晓巍%黄培堂

    조리하%안빙%허룡%장세위%장형형%양지신%주효외%황배당

    转铁蛋白受体%单链抗体%表达%纯化%血脑屏障 轉鐵蛋白受體%單鏈抗體%錶達%純化%血腦屏障
    전철단백수체%단련항체%표체%순화%혈뇌병장
    根据转铁蛋白受体和转铁蛋白特异性结合的性质,利用亲和纯化的方法从胎盘中提取转铁蛋白受体.以转铁蛋白受体为抗原包被免疫管,从全合成人源噬菌体单链抗体库中筛选其抗体.对筛选到的抗体进行特异性鉴定后,将抗体基因插入表达载体pET22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后获得可溶性表达.HeLa细胞的免疫组化结果显示,表达的抗体可以与转铁蛋白受体结合.表达产物经Ni-NTA金属螯和层析柱纯化、脱咪唑后,从尾静脉注射小鼠.1h后,去除血液及毛细血管的干扰,在脑实质中检测到了抗体的存在,说明该抗体可以通过血脑屏障.
    근거전철단백수체화전철단백특이성결합적성질,이용친화순화적방법종태반중제취전철단백수체.이전철단백수체위항원포피면역관,종전합성인원서균체단련항체고중사선기항체.대사선도적항체진행특이성감정후,장항체기인삽입표체재체pET22b(+),전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도후획득가용성표체.HeLa세포적면역조화결과현시,표체적항체가이여전철단백수체결합.표체산물경Ni-NTA금속오화층석주순화、탈미서후,종미정맥주사소서.1h후,거제혈액급모세혈관적간우,재뇌실질중검측도료항체적존재,설명해항체가이통과혈뇌병장.
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