热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2007年
1期
46-48,54
,共4页
陈奕慧%李孜%李涛%李巧燕%麦璟莹
陳奕慧%李孜%李濤%李巧燕%麥璟瑩
진혁혜%리자%리도%리교연%맥경형
日本血吸虫%免疫学筛选%TGF-β
日本血吸蟲%免疫學篩選%TGF-β
일본혈흡충%면역학사선%TGF-β
目的 为获得日本血吸虫(Schistosoma japonicum,Sj)转化生长因子β1(TGF-β1)基因的部分或全长cDNA序列,同时验证用针对某一蛋白的抗体筛选表达文库是否可以得到相应蛋白对应的基因序列.方法 采用兔抗鼠TGF-β1血清,对Si尾蚴cDNA表达文库进行免疫学筛选,对阳性克隆进行PCR扩增后,将大于500 bp的克隆进行复筛,对复筛阳性的克隆进行测序和生物信息学鉴定.结果 对大约106个噬菌斑进行了初筛,共获得7个阳性克隆;经过PCR扩增后,其中有4个克隆大于500 bp,复筛获得3个持续阳性克隆;对测序后的阳性克隆进行生物信息学鉴定,得到的三个克隆均与日本血吸虫辅酶Q10氧化还原酶(SjCHGC)基因具有高的同源性(Blastn分值都大于200).结论 SjCHGC蛋白与兔抗鼠TGF-β1抗体的反应为交叉反应,用抗某一蛋白的抗体筛选表达文库得到相应蛋白的基因序列的方法不一定可行.
目的 為穫得日本血吸蟲(Schistosoma japonicum,Sj)轉化生長因子β1(TGF-β1)基因的部分或全長cDNA序列,同時驗證用針對某一蛋白的抗體篩選錶達文庫是否可以得到相應蛋白對應的基因序列.方法 採用兔抗鼠TGF-β1血清,對Si尾蚴cDNA錶達文庫進行免疫學篩選,對暘性剋隆進行PCR擴增後,將大于500 bp的剋隆進行複篩,對複篩暘性的剋隆進行測序和生物信息學鑒定.結果 對大約106箇噬菌斑進行瞭初篩,共穫得7箇暘性剋隆;經過PCR擴增後,其中有4箇剋隆大于500 bp,複篩穫得3箇持續暘性剋隆;對測序後的暘性剋隆進行生物信息學鑒定,得到的三箇剋隆均與日本血吸蟲輔酶Q10氧化還原酶(SjCHGC)基因具有高的同源性(Blastn分值都大于200).結論 SjCHGC蛋白與兔抗鼠TGF-β1抗體的反應為交扠反應,用抗某一蛋白的抗體篩選錶達文庫得到相應蛋白的基因序列的方法不一定可行.
목적 위획득일본혈흡충(Schistosoma japonicum,Sj)전화생장인자β1(TGF-β1)기인적부분혹전장cDNA서렬,동시험증용침대모일단백적항체사선표체문고시부가이득도상응단백대응적기인서렬.방법 채용토항서TGF-β1혈청,대Si미유cDNA표체문고진행면역학사선,대양성극륭진행PCR확증후,장대우500 bp적극륭진행복사,대복사양성적극륭진행측서화생물신식학감정.결과 대대약106개서균반진행료초사,공획득7개양성극륭;경과PCR확증후,기중유4개극륭대우500 bp,복사획득3개지속양성극륭;대측서후적양성극륭진행생물신식학감정,득도적삼개극륭균여일본혈흡충보매Q10양화환원매(SjCHGC)기인구유고적동원성(Blastn분치도대우200).결론 SjCHGC단백여토항서TGF-β1항체적반응위교차반응,용항모일단백적항체사선표체문고득도상응단백적기인서렬적방법불일정가행.
