中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2008年
1期
1-5
,共5页
侯强%彭伍平%孙元%仇华吉
侯彊%彭伍平%孫元%仇華吉
후강%팽오평%손원%구화길
猪瘟病毒%E2蛋白%原核表达%单克隆抗体
豬瘟病毒%E2蛋白%原覈錶達%單剋隆抗體
저온병독%E2단백%원핵표체%단극륭항체
利用RT-PCR扩增了猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗株(C株)的E2蛋白主要抗原区(tE2)编码区,并定向克隆到表达载体pPROEX-HTb中,获得重组表达载体pPROEX-tE2,将其转化大肠杆菌DH5α菌株,经IPTG诱导,tE2蛋白获得高效表达;经检测,该重组蛋白能被CSFV C株抗血清识别.用纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了1株稳定分泌抗tE2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株.经检测,该单克隆抗体能够与CSFV C株和石门株以及杆状病毒表达的重组E2蛋白发生特异性反应.推测,该单克隆抗体是针对CSFV E2蛋白的一个保守线性表位.
利用RT-PCR擴增瞭豬瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗株(C株)的E2蛋白主要抗原區(tE2)編碼區,併定嚮剋隆到錶達載體pPROEX-HTb中,穫得重組錶達載體pPROEX-tE2,將其轉化大腸桿菌DH5α菌株,經IPTG誘導,tE2蛋白穫得高效錶達;經檢測,該重組蛋白能被CSFV C株抗血清識彆.用純化的重組蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融閤,穫得瞭1株穩定分泌抗tE2蛋白單剋隆抗體的雜交瘤細胞株.經檢測,該單剋隆抗體能夠與CSFV C株和石門株以及桿狀病毒錶達的重組E2蛋白髮生特異性反應.推測,該單剋隆抗體是針對CSFV E2蛋白的一箇保守線性錶位.
이용RT-PCR확증료저온병독(CSFV)토화약독역묘주(C주)적E2단백주요항원구(tE2)편마구,병정향극륭도표체재체pPROEX-HTb중,획득중조표체재체pPROEX-tE2,장기전화대장간균DH5α균주,경IPTG유도,tE2단백획득고효표체;경검측,해중조단백능피CSFV C주항혈청식별.용순화적중조단백면역BALB/c소서,취기비림파세포여SP2/0골수류세포융합,획득료1주은정분비항tE2단백단극륭항체적잡교류세포주.경검측,해단극륭항체능구여CSFV C주화석문주이급간상병독표체적중조E2단백발생특이성반응.추측,해단극륭항체시침대CSFV E2단백적일개보수선성표위.
