解放军医学杂志
解放軍醫學雜誌
해방군의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2008年
4期
417-418,424
,共3页
侍晓云%畅继武%邱明才%隋志芳%马富玲
侍曉雲%暢繼武%邱明纔%隋誌芳%馬富玲
시효운%창계무%구명재%수지방%마부령
变异%基因表达%胰岛素
變異%基因錶達%胰島素
변이%기인표체%이도소
目的 了解变异的胰岛素基因(insulin/furin)在HepG2细胞系中表达及活性胰岛素的产生情况.方法 构建含有insulin/furin的表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin并转染HepG2细胞,RT-PCR和放射免疫分析法从mRNA和蛋白质水平观察转染后HepG2细胞中insulin/furin的表达和胰岛素的产生情况.结果 Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ双酶切验证质粒p(G1RE)3BP-11×furin,切下260bp和4 700bp两个片段,回收260bp片段测序证实为insulin/furin;RT-PCR检测转染后的HepG2细胞有insulin/furin的表达,DNA测序证实为insulin/furin;培养基中可检测到胰岛素.结论 含insulin/furin的真核表达质粒p(G1RE)3BP-11×furin转染HepG2细胞,insulin/furin成功地在HepG2细胞中表达,并产生有生物活性的胰岛素.
目的 瞭解變異的胰島素基因(insulin/furin)在HepG2細胞繫中錶達及活性胰島素的產生情況.方法 構建含有insulin/furin的錶達質粒p(G1RE)3BP-11×furin併轉染HepG2細胞,RT-PCR和放射免疫分析法從mRNA和蛋白質水平觀察轉染後HepG2細胞中insulin/furin的錶達和胰島素的產生情況.結果 Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ雙酶切驗證質粒p(G1RE)3BP-11×furin,切下260bp和4 700bp兩箇片段,迴收260bp片段測序證實為insulin/furin;RT-PCR檢測轉染後的HepG2細胞有insulin/furin的錶達,DNA測序證實為insulin/furin;培養基中可檢測到胰島素.結論 含insulin/furin的真覈錶達質粒p(G1RE)3BP-11×furin轉染HepG2細胞,insulin/furin成功地在HepG2細胞中錶達,併產生有生物活性的胰島素.
목적 료해변이적이도소기인(insulin/furin)재HepG2세포계중표체급활성이도소적산생정황.방법 구건함유insulin/furin적표체질립p(G1RE)3BP-11×furin병전염HepG2세포,RT-PCR화방사면역분석법종mRNA화단백질수평관찰전염후HepG2세포중insulin/furin적표체화이도소적산생정황.결과 Hind Ⅲ화EcoR Ⅴ쌍매절험증질립p(G1RE)3BP-11×furin,절하260bp화4 700bp량개편단,회수260bp편단측서증실위insulin/furin;RT-PCR검측전염후적HepG2세포유insulin/furin적표체,DNA측서증실위insulin/furin;배양기중가검측도이도소.결론 함insulin/furin적진핵표체질립p(G1RE)3BP-11×furin전염HepG2세포,insulin/furin성공지재HepG2세포중표체,병산생유생물활성적이도소.
