分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2009年
4期
839-844
,共6页
袁金玲%张朵%顾小平%岳晋军%陈益泰
袁金玲%張朵%顧小平%嶽晉軍%陳益泰
원금령%장타%고소평%악진군%진익태
孝顺竹%愈伤组织%悬浮培养%转速%2,4-D
孝順竹%愈傷組織%懸浮培養%轉速%2,4-D
효순죽%유상조직%현부배양%전속%2,4-D
本研究利用孝顺竹种胚诱导出的淡黄色胚性愈伤组织为材料,对影响细胞悬浮培养的摇床转速、培养液2,4-D浓度、继代天数、接种细胞浓度(W/V)等因素进行了研究.结果表明,悬浮培养时的摇床转速以120 r/min时培养效果较好,转速低于100 r/min时,愈伤组织容易结团,分散性差;适宜的2,4-D浓度为4～6 mg/L,低于4 mg/L时愈伤组织易褐变;接种后培养7 d是最佳的转接时期,至多不能超过10 d;接种细胞密度以4.0%最为合适,可保持较高的增殖速度,同时培养产物较多.在50 mL培养液(NB+500 mg/L Pro-line+500 mg/L Glutamine+300 mg/L Hydrolyzed casein+30 mg/L Sucrose+4～6 mg/L 2,4-D)中接种4.0%的愈伤组织,于120 r/min的转速下经过7 d培养,可增殖一倍以上,以后每7 d继代转接一次,培养大约一个月,便可以建立生长迅速、分散性好、均一的悬浮细胞系.
本研究利用孝順竹種胚誘導齣的淡黃色胚性愈傷組織為材料,對影響細胞懸浮培養的搖床轉速、培養液2,4-D濃度、繼代天數、接種細胞濃度(W/V)等因素進行瞭研究.結果錶明,懸浮培養時的搖床轉速以120 r/min時培養效果較好,轉速低于100 r/min時,愈傷組織容易結糰,分散性差;適宜的2,4-D濃度為4～6 mg/L,低于4 mg/L時愈傷組織易褐變;接種後培養7 d是最佳的轉接時期,至多不能超過10 d;接種細胞密度以4.0%最為閤適,可保持較高的增殖速度,同時培養產物較多.在50 mL培養液(NB+500 mg/L Pro-line+500 mg/L Glutamine+300 mg/L Hydrolyzed casein+30 mg/L Sucrose+4～6 mg/L 2,4-D)中接種4.0%的愈傷組織,于120 r/min的轉速下經過7 d培養,可增殖一倍以上,以後每7 d繼代轉接一次,培養大約一箇月,便可以建立生長迅速、分散性好、均一的懸浮細胞繫.
본연구이용효순죽충배유도출적담황색배성유상조직위재료,대영향세포현부배양적요상전속、배양액2,4-D농도、계대천수、접충세포농도(W/V)등인소진행료연구.결과표명,현부배양시적요상전속이120 r/min시배양효과교호,전속저우100 r/min시,유상조직용역결단,분산성차;괄의적2,4-D농도위4～6 mg/L,저우4 mg/L시유상조직역갈변;접충후배양7 d시최가적전접시기,지다불능초과10 d;접충세포밀도이4.0%최위합괄,가보지교고적증식속도,동시배양산물교다.재50 mL배양액(NB+500 mg/L Pro-line+500 mg/L Glutamine+300 mg/L Hydrolyzed casein+30 mg/L Sucrose+4～6 mg/L 2,4-D)중접충4.0%적유상조직,우120 r/min적전속하경과7 d배양,가증식일배이상,이후매7 d계대전접일차,배양대약일개월,편가이건립생장신속、분산성호、균일적현부세포계.
