生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
2期
146-150,183
,共6页
胡廷章%肖国生%陈再刚%石汝杰%吴应梅
鬍廷章%肖國生%陳再剛%石汝傑%吳應梅
호정장%초국생%진재강%석여걸%오응매
脂氧合酶%番茄%脂氧合酶活性%毕赤酵母%TomloxD
脂氧閤酶%番茄%脂氧閤酶活性%畢赤酵母%TomloxD
지양합매%번가%지양합매활성%필적효모%TomloxD
将番茄脂氧合酶基因TomloxD克隆至酵母表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母GS115菌株,构建组成型表达T0mloxD的酵母工程菌株.SDS-PAGE和western blot分析表明,经甲醇诱导,TomloxD蛋白在酵母中得到表达,表达的融合蛋白分子量约为103.56 kD,与预测的分子量一致.酶活性分析表明,酵母中表达的TomloxD蛋白具有脂氧合酶活性.半定量RT-PCR分析表明,TomloxD基因在番茄中表达受机械损伤的诱导,损伤处理的番茄叶片中腊氧合酶的活性明显增高.说明T0mloxD基因在番茄防御信号中发挥作用.
將番茄脂氧閤酶基因TomloxD剋隆至酵母錶達載體pPIC9K中,轉化畢赤酵母GS115菌株,構建組成型錶達T0mloxD的酵母工程菌株.SDS-PAGE和western blot分析錶明,經甲醇誘導,TomloxD蛋白在酵母中得到錶達,錶達的融閤蛋白分子量約為103.56 kD,與預測的分子量一緻.酶活性分析錶明,酵母中錶達的TomloxD蛋白具有脂氧閤酶活性.半定量RT-PCR分析錶明,TomloxD基因在番茄中錶達受機械損傷的誘導,損傷處理的番茄葉片中臘氧閤酶的活性明顯增高.說明T0mloxD基因在番茄防禦信號中髮揮作用.
장번가지양합매기인TomloxD극륭지효모표체재체pPIC9K중,전화필적효모GS115균주,구건조성형표체T0mloxD적효모공정균주.SDS-PAGE화western blot분석표명,경갑순유도,TomloxD단백재효모중득도표체,표체적융합단백분자량약위103.56 kD,여예측적분자량일치.매활성분석표명,효모중표체적TomloxD단백구유지양합매활성.반정량RT-PCR분석표명,TomloxD기인재번가중표체수궤계손상적유도,손상처리적번가협편중석양합매적활성명현증고.설명T0mloxD기인재번가방어신호중발휘작용.
