江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
1期
110-115
,共6页
朱丽萍%颜世敢%李雁冰%张玉忠
硃麗萍%顏世敢%李雁冰%張玉忠
주려평%안세감%리안빙%장옥충
别藻蓝蛋白%蛋白质标记%荧光抗抗体
彆藻藍蛋白%蛋白質標記%熒光抗抗體
별조람단백%단백질표기%형광항항체
将别藻蓝蛋白(Allophycocyanin,APC)与抗鸡IgG抗体交联制备荧光抗抗体,用于鸡疫病的间接荧光检测.首先采用羟基磷灰石层析和阴离子交换层析法高效制备APC,然后利用蛋白质交联技术高效制备荧光抗抗体.分别用摩尔比50:1、100:1的交联剂3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)将APC、抗鸡IgG抗体衍生,衍生物以摩尔比1:1液相交联,经高压液相色谱(HPLC)纯化制备出APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体,最后对制备的荧光抗抗体从荧光特性、吸收光谱特性、抗体活性、稳定性及纯度等方面进行鉴定.结果表明,APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体交联效率达95%以上,纯度达电泳纯,红色荧光明亮,抗体活性高,4 ℃保存90 d荧光亮度和抗体活性稳定.研制的APC标记的抗鸡IgG荧光抗抗体可作为通用荧光抗抗体用于鸡传染性疾病的间接免疫荧光检测.
將彆藻藍蛋白(Allophycocyanin,APC)與抗鷄IgG抗體交聯製備熒光抗抗體,用于鷄疫病的間接熒光檢測.首先採用羥基燐灰石層析和陰離子交換層析法高效製備APC,然後利用蛋白質交聯技術高效製備熒光抗抗體.分彆用摩爾比50:1、100:1的交聯劑3-(2-吡啶二巰基)丙痠N-羥基琥珀酰亞胺酯(SPDP)將APC、抗鷄IgG抗體衍生,衍生物以摩爾比1:1液相交聯,經高壓液相色譜(HPLC)純化製備齣APC標記的抗鷄IgG熒光抗抗體,最後對製備的熒光抗抗體從熒光特性、吸收光譜特性、抗體活性、穩定性及純度等方麵進行鑒定.結果錶明,APC標記的抗鷄IgG熒光抗抗體交聯效率達95%以上,純度達電泳純,紅色熒光明亮,抗體活性高,4 ℃保存90 d熒光亮度和抗體活性穩定.研製的APC標記的抗鷄IgG熒光抗抗體可作為通用熒光抗抗體用于鷄傳染性疾病的間接免疫熒光檢測.
장별조람단백(Allophycocyanin,APC)여항계IgG항체교련제비형광항항체,용우계역병적간접형광검측.수선채용간기린회석층석화음리자교환층석법고효제비APC,연후이용단백질교련기술고효제비형광항항체.분별용마이비50:1、100:1적교련제3-(2-필정이구기)병산N-간기호박선아알지(SPDP)장APC、항계IgG항체연생,연생물이마이비1:1액상교련,경고압액상색보(HPLC)순화제비출APC표기적항계IgG형광항항체,최후대제비적형광항항체종형광특성、흡수광보특성、항체활성、은정성급순도등방면진행감정.결과표명,APC표기적항계IgG형광항항체교련효솔체95%이상,순도체전영순,홍색형광명량,항체활성고,4 ℃보존90 d형광량도화항체활성은정.연제적APC표기적항계IgG형광항항체가작위통용형광항항체용우계전염성질병적간접면역형광검측.
