生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2011年
4期
16-19
,共4页
赵雪娜%武国栋%孙丽霞%黄山英%王庆民%薛彤彤%王晶翼
趙雪娜%武國棟%孫麗霞%黃山英%王慶民%薛彤彤%王晶翼
조설나%무국동%손려하%황산영%왕경민%설동동%왕정익
TRAIL%可溶形式表达%活性检测%抑制率
TRAIL%可溶形式錶達%活性檢測%抑製率
TRAIL%가용형식표체%활성검측%억제솔
目的:构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)高表达工程菌株,以获得具有生物学活性的重组TRAIL蛋白.方法:合成TRAIL基因,转到大肠杆菌中,IPTG诱导获得成功表达；进一步优化,增加可溶形式的蛋白质.利用硫酸铵对发酵液进行沉淀,经Ni柱、阴离子和阳离子交换柱层析,最终获得蛋白质纯品,对其进行体外活性检测.结果:经过IPTG诱导后,TRAIL达到菌体总蛋白的30％；经过优化,可溶形式蛋白达到55％.纯化获得纯度高于95％的TRAIL样品,体外测活结果表明:TRAIL蛋白能有效抑制多种肿瘤细胞增殖,抑制率达到70％-92％.结论:重组TRAIL以可溶形式得到高效表达,且具有较好的生物学活性,为其开发成药用蛋白奠定基础.
目的:構建腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)高錶達工程菌株,以穫得具有生物學活性的重組TRAIL蛋白.方法:閤成TRAIL基因,轉到大腸桿菌中,IPTG誘導穫得成功錶達；進一步優化,增加可溶形式的蛋白質.利用硫痠銨對髮酵液進行沉澱,經Ni柱、陰離子和暘離子交換柱層析,最終穫得蛋白質純品,對其進行體外活性檢測.結果:經過IPTG誘導後,TRAIL達到菌體總蛋白的30％；經過優化,可溶形式蛋白達到55％.純化穫得純度高于95％的TRAIL樣品,體外測活結果錶明:TRAIL蛋白能有效抑製多種腫瘤細胞增殖,抑製率達到70％-92％.結論:重組TRAIL以可溶形式得到高效錶達,且具有較好的生物學活性,為其開髮成藥用蛋白奠定基礎.
목적:구건종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL)고표체공정균주,이획득구유생물학활성적중조TRAIL단백.방법:합성TRAIL기인,전도대장간균중,IPTG유도획득성공표체；진일보우화,증가가용형식적단백질.이용류산안대발효액진행침정,경Ni주、음리자화양리자교환주층석,최종획득단백질순품,대기진행체외활성검측.결과:경과IPTG유도후,TRAIL체도균체총단백적30％；경과우화,가용형식단백체도55％.순화획득순도고우95％적TRAIL양품,체외측활결과표명:TRAIL단백능유효억제다충종류세포증식,억제솔체도70％-92％.결론:중조TRAIL이가용형식득도고효표체,차구유교호적생물학활성,위기개발성약용단백전정기출.
