同济大学学报（医学版）
同濟大學學報（醫學版）
동제대학학보（의학판）
JOURNAL OF TONGJI UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2011年
5期
23-26,51
,共5页
周奇%李婷%王国增%赵婧%刘岚%吴乾渝
週奇%李婷%王國增%趙婧%劉嵐%吳乾渝
주기%리정%왕국증%조청%류람%오건투
宫颈肿瘤%Twist%RNA干扰%细胞黏附%细胞铺展%细胞迁移
宮頸腫瘤%Twist%RNA榦擾%細胞黏附%細胞鋪展%細胞遷移
궁경종류%Twist%RNA간우%세포점부%세포포전%세포천이
目的 通过RNA干扰抑制Twist基因在人宫颈癌HeLa细胞中的表达,观察Twist基因沉默对HeLa细胞体外黏附、铺展及迁移能力的影响.方法 根据shRNA设计原则,构建两种靶向Twist基因的短发夹RNA(shRNA)干扰质粒,稳定转染HeLa细胞.通过荧光定量PCR及Western印迹法检测HeLa细胞中Twist基因mRNA和蛋白的表达水平,利用黏附实验、铺展实验和划痕实验检测其对细胞黏附力和迁移力的影响.结果 成功构建的Twist shRNA真核表达载体稳定转染HeLa细胞后可显著降低Twist基因的表达.与对照组相比,Twist基因沉默组细胞的黏附、铺展及迁移能力明显下降(P＜0.05).结论 成功构建的Twist shRNA真核表达载体,能有效抑制HeLa细胞黏附、铺展及迁移能力.
目的 通過RNA榦擾抑製Twist基因在人宮頸癌HeLa細胞中的錶達,觀察Twist基因沉默對HeLa細胞體外黏附、鋪展及遷移能力的影響.方法 根據shRNA設計原則,構建兩種靶嚮Twist基因的短髮夾RNA(shRNA)榦擾質粒,穩定轉染HeLa細胞.通過熒光定量PCR及Western印跡法檢測HeLa細胞中Twist基因mRNA和蛋白的錶達水平,利用黏附實驗、鋪展實驗和劃痕實驗檢測其對細胞黏附力和遷移力的影響.結果 成功構建的Twist shRNA真覈錶達載體穩定轉染HeLa細胞後可顯著降低Twist基因的錶達.與對照組相比,Twist基因沉默組細胞的黏附、鋪展及遷移能力明顯下降(P＜0.05).結論 成功構建的Twist shRNA真覈錶達載體,能有效抑製HeLa細胞黏附、鋪展及遷移能力.
목적 통과RNA간우억제Twist기인재인궁경암HeLa세포중적표체,관찰Twist기인침묵대HeLa세포체외점부、포전급천이능력적영향.방법 근거shRNA설계원칙,구건량충파향Twist기인적단발협RNA(shRNA)간우질립,은정전염HeLa세포.통과형광정량PCR급Western인적법검측HeLa세포중Twist기인mRNA화단백적표체수평,이용점부실험、포전실험화화흔실험검측기대세포점부력화천이력적영향.결과 성공구건적Twist shRNA진핵표체재체은정전염HeLa세포후가현저강저Twist기인적표체.여대조조상비,Twist기인침묵조세포적점부、포전급천이능력명현하강(P＜0.05).결론 성공구건적Twist shRNA진핵표체재체,능유효억제HeLa세포점부、포전급천이능력.
