实用检验医师杂志
實用檢驗醫師雜誌
실용검험의사잡지
Chinese Journal of Laboratory Pathologist
2011年
3期
137-141
,共5页
栾芳%张炳昌%王勇%范卫华%成士清%马春红
欒芳%張炳昌%王勇%範衛華%成士清%馬春紅
란방%장병창%왕용%범위화%성사청%마춘홍
preS2蛋白%hTERT启动子%转录调控%激活作用
preS2蛋白%hTERT啟動子%轉錄調控%激活作用
preS2단백%hTERT계동자%전록조공%격활작용
目的 探讨乙型肝炎病毒编码的preS2蛋白对人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子的激活作用.方法 PCR扩增人preS2基因,构建preS2与绿色荧光蛋白融合表达的载体pEGFP-preS2,共转染后通过荧光显微镜检测融合基因的表达.将pEGFP-preS2和hTERT全长启动子报告质粒pGL3B-TRTP共转染HepG2细胞,48 h后裂解细胞,双荧光检测分析preS2对hTERT启动子的激活作用.结果 荧光显微镜检测证实pEGFP-preS2可在体外有效表达preS2融合蛋白,双荧光试验表明preS2可显著激活hTERT启动子,此激活作用具有剂量依赖性.结论 成功构建preS2绿色荧光融合表达载体,并初步证实其对hTERT启动子的激活作用,为进一步探讨肝癌发生中hTERT表达调控机制奠定基础.
目的 探討乙型肝炎病毒編碼的preS2蛋白對人耑粒酶逆轉錄酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)啟動子的激活作用.方法 PCR擴增人preS2基因,構建preS2與綠色熒光蛋白融閤錶達的載體pEGFP-preS2,共轉染後通過熒光顯微鏡檢測融閤基因的錶達.將pEGFP-preS2和hTERT全長啟動子報告質粒pGL3B-TRTP共轉染HepG2細胞,48 h後裂解細胞,雙熒光檢測分析preS2對hTERT啟動子的激活作用.結果 熒光顯微鏡檢測證實pEGFP-preS2可在體外有效錶達preS2融閤蛋白,雙熒光試驗錶明preS2可顯著激活hTERT啟動子,此激活作用具有劑量依賴性.結論 成功構建preS2綠色熒光融閤錶達載體,併初步證實其對hTERT啟動子的激活作用,為進一步探討肝癌髮生中hTERT錶達調控機製奠定基礎.
목적 탐토을형간염병독편마적preS2단백대인단립매역전록매(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)계동자적격활작용.방법 PCR확증인preS2기인,구건preS2여록색형광단백융합표체적재체pEGFP-preS2,공전염후통과형광현미경검측융합기인적표체.장pEGFP-preS2화hTERT전장계동자보고질립pGL3B-TRTP공전염HepG2세포,48 h후렬해세포,쌍형광검측분석preS2대hTERT계동자적격활작용.결과 형광현미경검측증실pEGFP-preS2가재체외유효표체preS2융합단백,쌍형광시험표명preS2가현저격활hTERT계동자,차격활작용구유제량의뢰성.결론 성공구건preS2록색형광융합표체재체,병초보증실기대hTERT계동자적격활작용,위진일보탐토간암발생중hTERT표체조공궤제전정기출.
