临床肿瘤学杂志
臨床腫瘤學雜誌
림상종류학잡지
CHINESE CLINICAL ONCOLOGY
2012年
5期
392-397
,共6页
印洁%李玉枫%宋勇%姚鸣%高云%孙倍成%施毅
印潔%李玉楓%宋勇%姚鳴%高雲%孫倍成%施毅
인길%리옥풍%송용%요명%고운%손배성%시의
miR-21%肺癌%凋亡%培美曲塞
miR-21%肺癌%凋亡%培美麯塞
miR-21%폐암%조망%배미곡새
目的 检测不同miR-21表达水平的人肺癌细胞对培美曲塞的药物敏感性,并探讨可能作用机制.方法 采用Annexin V-EGFP荧光染色法定性检测及流式细胞术定量检测培美曲塞对不同miR-21表达水平的A549人肺癌细胞凋亡诱导作用,级联酶底物显色法检测caspase-3的活化状态,蛋白免疫杂交法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平变化.结果 20μmol/L培美曲塞作用24h可以诱导高表达miR-21的A549人肺癌细胞(A549-21H0)和低表达miR-21的A549细胞(A549-21L0)的凋亡,且A549-21L0处于细胞凋亡晚期,而A549-21H0处于细胞凋亡早期.5μmol/L培美曲塞作用24h可以诱导65.3％的A549-21L0细胞早期凋亡,仅诱导2.8％的A549-21H0细胞早期凋亡.5μmol/L培美曲塞作用6h即可引起A549-21L0细胞中caspase-3活化,与作用前相比活化效应超过2倍(P＜0.01)；在9h时活化效应最强,活化效应超过7倍(P＜0.01)；18h后活化效应超过6倍(P＜0.01)；至24h时活化效应仍在5倍以上(P＜0.01).同样条件下,5μmol/L培美曲塞作用18h才引起A549-21H0细胞中caspase-3活化,与作用前相比活化效应接近3倍(P＜0.01),至24h活化效应在4倍以上(P＜0.01).5 μmol/L培美曲塞作用于A549-21L0细胞9h即可引起Bax表达水平显著性升高和Bcl-2表达水平明显下降.结论 A549-21L0人肺癌细胞对培美曲塞诱导的细胞凋亡具有更高的敏感性.培美曲塞可引起A549-21L0细胞中caspase-3活化,并可通过调控Bax和Bcl-2表达水平诱导凋亡,这种效应具有一定的时间-效应关系.
目的 檢測不同miR-21錶達水平的人肺癌細胞對培美麯塞的藥物敏感性,併探討可能作用機製.方法 採用Annexin V-EGFP熒光染色法定性檢測及流式細胞術定量檢測培美麯塞對不同miR-21錶達水平的A549人肺癌細胞凋亡誘導作用,級聯酶底物顯色法檢測caspase-3的活化狀態,蛋白免疫雜交法檢測凋亡相關蛋白Bcl-2、Bax的錶達水平變化.結果 20μmol/L培美麯塞作用24h可以誘導高錶達miR-21的A549人肺癌細胞(A549-21H0)和低錶達miR-21的A549細胞(A549-21L0)的凋亡,且A549-21L0處于細胞凋亡晚期,而A549-21H0處于細胞凋亡早期.5μmol/L培美麯塞作用24h可以誘導65.3％的A549-21L0細胞早期凋亡,僅誘導2.8％的A549-21H0細胞早期凋亡.5μmol/L培美麯塞作用6h即可引起A549-21L0細胞中caspase-3活化,與作用前相比活化效應超過2倍(P＜0.01)；在9h時活化效應最彊,活化效應超過7倍(P＜0.01)；18h後活化效應超過6倍(P＜0.01)；至24h時活化效應仍在5倍以上(P＜0.01).同樣條件下,5μmol/L培美麯塞作用18h纔引起A549-21H0細胞中caspase-3活化,與作用前相比活化效應接近3倍(P＜0.01),至24h活化效應在4倍以上(P＜0.01).5 μmol/L培美麯塞作用于A549-21L0細胞9h即可引起Bax錶達水平顯著性升高和Bcl-2錶達水平明顯下降.結論 A549-21L0人肺癌細胞對培美麯塞誘導的細胞凋亡具有更高的敏感性.培美麯塞可引起A549-21L0細胞中caspase-3活化,併可通過調控Bax和Bcl-2錶達水平誘導凋亡,這種效應具有一定的時間-效應關繫.
목적 검측불동miR-21표체수평적인폐암세포대배미곡새적약물민감성,병탐토가능작용궤제.방법 채용Annexin V-EGFP형광염색법정성검측급류식세포술정량검측배미곡새대불동miR-21표체수평적A549인폐암세포조망유도작용,급련매저물현색법검측caspase-3적활화상태,단백면역잡교법검측조망상관단백Bcl-2、Bax적표체수평변화.결과 20μmol/L배미곡새작용24h가이유도고표체miR-21적A549인폐암세포(A549-21H0)화저표체miR-21적A549세포(A549-21L0)적조망,차A549-21L0처우세포조망만기,이A549-21H0처우세포조망조기.5μmol/L배미곡새작용24h가이유도65.3％적A549-21L0세포조기조망,부유도2.8％적A549-21H0세포조기조망.5μmol/L배미곡새작용6h즉가인기A549-21L0세포중caspase-3활화,여작용전상비활화효응초과2배(P＜0.01)；재9h시활화효응최강,활화효응초과7배(P＜0.01)；18h후활화효응초과6배(P＜0.01)；지24h시활화효응잉재5배이상(P＜0.01).동양조건하,5μmol/L배미곡새작용18h재인기A549-21H0세포중caspase-3활화,여작용전상비활화효응접근3배(P＜0.01),지24h활화효응재4배이상(P＜0.01).5 μmol/L배미곡새작용우A549-21L0세포9h즉가인기Bax표체수평현저성승고화Bcl-2표체수평명현하강.결론 A549-21L0인폐암세포대배미곡새유도적세포조망구유경고적민감성.배미곡새가인기A549-21L0세포중caspase-3활화,병가통과조공Bax화Bcl-2표체수평유도조망,저충효응구유일정적시간-효응관계.
