中国寄生虫病防治杂志
中國寄生蟲病防治雜誌
중국기생충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
2003年
6期
332-334
,共3页
周水森%汤林华%薛海筹%夏明仪
週水森%湯林華%薛海籌%夏明儀
주수삼%탕림화%설해주%하명의
微小按蚊%亲缘种%D3基因%分子鉴别
微小按蚊%親緣種%D3基因%分子鑒彆
미소안문%친연충%D3기인%분자감별
目的建立微小按蚊复合体不同亲缘种A和C的分子鉴别方法-PCR产物酶切片段长度多态性分析(PCR-RFLP). 方法用单蚊蚊腿消化提取基因组DNA,PCR特异扩增核糖体28S第3结构域 (D3)基因,对PCR产物进行纯化、克隆和测序;分析微小按蚊A和C D3基因的酶切图谱,选择合适的限制性内切酶对两者PCR产物进行特异性切割, 按照酶切片段长度区分两亲缘种. 结果微小按蚊A被限制性内切酶 MboII切割后在约376 bp、268 bp和108 bp处出现3条条带,而微小按蚊C因第96 bp、97 bp位点突变,不存在限制性内切酶 MboII的特异识别位点而未被消化,仅在376 bp处存在唯一条带. 结论本实验建立的PCR-RFLP分子鉴别方法能有效地将形态难以鉴别的微小按蚊亲缘种A和C(GenBank: AF416782, AF415594)区分开来.
目的建立微小按蚊複閤體不同親緣種A和C的分子鑒彆方法-PCR產物酶切片段長度多態性分析(PCR-RFLP). 方法用單蚊蚊腿消化提取基因組DNA,PCR特異擴增覈糖體28S第3結構域 (D3)基因,對PCR產物進行純化、剋隆和測序;分析微小按蚊A和C D3基因的酶切圖譜,選擇閤適的限製性內切酶對兩者PCR產物進行特異性切割, 按照酶切片段長度區分兩親緣種. 結果微小按蚊A被限製性內切酶 MboII切割後在約376 bp、268 bp和108 bp處齣現3條條帶,而微小按蚊C因第96 bp、97 bp位點突變,不存在限製性內切酶 MboII的特異識彆位點而未被消化,僅在376 bp處存在唯一條帶. 結論本實驗建立的PCR-RFLP分子鑒彆方法能有效地將形態難以鑒彆的微小按蚊親緣種A和C(GenBank: AF416782, AF415594)區分開來.
목적건립미소안문복합체불동친연충A화C적분자감별방법-PCR산물매절편단장도다태성분석(PCR-RFLP). 방법용단문문퇴소화제취기인조DNA,PCR특이확증핵당체28S제3결구역 (D3)기인,대PCR산물진행순화、극륭화측서;분석미소안문A화C D3기인적매절도보,선택합괄적한제성내절매대량자PCR산물진행특이성절할, 안조매절편단장도구분량친연충. 결과미소안문A피한제성내절매 MboII절할후재약376 bp、268 bp화108 bp처출현3조조대,이미소안문C인제96 bp、97 bp위점돌변,불존재한제성내절매 MboII적특이식별위점이미피소화,부재376 bp처존재유일조대. 결론본실험건립적PCR-RFLP분자감별방법능유효지장형태난이감별적미소안문친연충A화C(GenBank: AF416782, AF415594)구분개래.
