中国现代医生
中國現代醫生
중국현대의생
CHINA MODERN DOCTOR
2007年
8期
18-20,9
,共4页
缝隙连接%连接蛋白43%脑缺氧%脑缺血%新生%大鼠%细胞凋亡
縫隙連接%連接蛋白43%腦缺氧%腦缺血%新生%大鼠%細胞凋亡
봉극련접%련접단백43%뇌결양%뇌결혈%신생%대서%세포조망
目的 目的研究Cx43在新生大鼠HIBD的表达,探讨其在HIBD的作用及意义.方法 7d龄健康SD大鼠128只,随机分为对照组和缺氧缺血组,每组64只.两组大鼠根据处死时相点每组再随机分为6h、24h、48h、72h四个小组,每组16只.每组大鼠取8只,采用HE染色、DNA原位末端标记法、免疫组化染色方法观察各组新生大鼠脑组织病理变化、细胞凋亡及Cx43表达、分布情况;每组另外8只应用Western-blot定量分析Cx43蛋白在皮层及海马的表达.结果 对照组各时相点皮层、海马未见DNA原位末端标记法阳性细胞;缺氧缺血组24h组开始细胞凋亡细胞逐渐增多,缺氧缺血组24h、48h、72h组的凋亡阳性细胞分别为15.12±2.68、30.24±3.65、68.72±5.60,各组差异有显著性意义,P＜0.01;对照组均有Cx43表达,6h、24h、48h、72h组Cx43染色阳性面积分别为(8.38±0.16)%、(8.38±0.19)%、(8.39±0.03)%、(8.35±0.15)%,各时相点组Cx43阳性表达差异无显著意义,P＞0.05;缺氧缺血后6h、24h、48h、72h组Cx43染色阳性面积分别为(18.64±0.30)%、(29.65±0.26)%、(35.34±0.21)%、(42.05±0.31)%,随着缺氧缺血后时间的推移,Cx43阳性表达逐渐增加,各组对比,差异有显著意义,P＜0.01;缺氧缺血组与对照组对比,缺氧缺血组各时相点Cx43阳性表达均高于对照组,P＜0.01;Western-blot结果:各组电泳均可显示在43-46KD范围的条带,Cx43/GAPDH电泳条带密度比值对照组6h、24h、48h、72h分别为1.00±0.01、0.99±0.02、1.01±0.01、1.01±0.01;缺氧缺血组6h、24h、48h、72hCx43/GAPDH电泳条带比值分别为1.11±0.04、1.25±0.02、1.37±0.01、1.50±0.01;缺氧缺血组与对照组对比,同一时相点Cx43蛋白的表达均较对照组高,P＜0.01;缺氧缺血6h组Cx43表达已开始增加,随着缺氧缺血后时间的推移逐渐增加,至72h组最明显,缺氧缺血各组间比较,差异有显著意义,P＜0.01;对照组各时相点比较,Cx43蛋白的表达差异无显著意义,P＞0.05.结论 缺氧缺血后Cx43的表达逐渐增加,其变化规律与神经细胞凋亡严重程度及光镜观察到的脑损伤进展的时间框架相吻合.且发生时间早于细胞凋亡,提示Cx43表达的增加参与了新生大鼠HIBD的病理形成过程,推测其通过缝隙连接增强传播和放大细胞损伤,在HIBD早期发挥"姐妹杀伤效应",导致和加重脑损害.
目的 目的研究Cx43在新生大鼠HIBD的錶達,探討其在HIBD的作用及意義.方法 7d齡健康SD大鼠128隻,隨機分為對照組和缺氧缺血組,每組64隻.兩組大鼠根據處死時相點每組再隨機分為6h、24h、48h、72h四箇小組,每組16隻.每組大鼠取8隻,採用HE染色、DNA原位末耑標記法、免疫組化染色方法觀察各組新生大鼠腦組織病理變化、細胞凋亡及Cx43錶達、分佈情況;每組另外8隻應用Western-blot定量分析Cx43蛋白在皮層及海馬的錶達.結果 對照組各時相點皮層、海馬未見DNA原位末耑標記法暘性細胞;缺氧缺血組24h組開始細胞凋亡細胞逐漸增多,缺氧缺血組24h、48h、72h組的凋亡暘性細胞分彆為15.12±2.68、30.24±3.65、68.72±5.60,各組差異有顯著性意義,P＜0.01;對照組均有Cx43錶達,6h、24h、48h、72h組Cx43染色暘性麵積分彆為(8.38±0.16)%、(8.38±0.19)%、(8.39±0.03)%、(8.35±0.15)%,各時相點組Cx43暘性錶達差異無顯著意義,P＞0.05;缺氧缺血後6h、24h、48h、72h組Cx43染色暘性麵積分彆為(18.64±0.30)%、(29.65±0.26)%、(35.34±0.21)%、(42.05±0.31)%,隨著缺氧缺血後時間的推移,Cx43暘性錶達逐漸增加,各組對比,差異有顯著意義,P＜0.01;缺氧缺血組與對照組對比,缺氧缺血組各時相點Cx43暘性錶達均高于對照組,P＜0.01;Western-blot結果:各組電泳均可顯示在43-46KD範圍的條帶,Cx43/GAPDH電泳條帶密度比值對照組6h、24h、48h、72h分彆為1.00±0.01、0.99±0.02、1.01±0.01、1.01±0.01;缺氧缺血組6h、24h、48h、72hCx43/GAPDH電泳條帶比值分彆為1.11±0.04、1.25±0.02、1.37±0.01、1.50±0.01;缺氧缺血組與對照組對比,同一時相點Cx43蛋白的錶達均較對照組高,P＜0.01;缺氧缺血6h組Cx43錶達已開始增加,隨著缺氧缺血後時間的推移逐漸增加,至72h組最明顯,缺氧缺血各組間比較,差異有顯著意義,P＜0.01;對照組各時相點比較,Cx43蛋白的錶達差異無顯著意義,P＞0.05.結論 缺氧缺血後Cx43的錶達逐漸增加,其變化規律與神經細胞凋亡嚴重程度及光鏡觀察到的腦損傷進展的時間框架相吻閤.且髮生時間早于細胞凋亡,提示Cx43錶達的增加參與瞭新生大鼠HIBD的病理形成過程,推測其通過縫隙連接增彊傳播和放大細胞損傷,在HIBD早期髮揮"姐妹殺傷效應",導緻和加重腦損害.
목적 목적연구Cx43재신생대서HIBD적표체,탐토기재HIBD적작용급의의.방법 7d령건강SD대서128지,수궤분위대조조화결양결혈조,매조64지.량조대서근거처사시상점매조재수궤분위6h、24h、48h、72h사개소조,매조16지.매조대서취8지,채용HE염색、DNA원위말단표기법、면역조화염색방법관찰각조신생대서뇌조직병리변화、세포조망급Cx43표체、분포정황;매조령외8지응용Western-blot정량분석Cx43단백재피층급해마적표체.결과 대조조각시상점피층、해마미견DNA원위말단표기법양성세포;결양결혈조24h조개시세포조망세포축점증다,결양결혈조24h、48h、72h조적조망양성세포분별위15.12±2.68、30.24±3.65、68.72±5.60,각조차이유현저성의의,P＜0.01;대조조균유Cx43표체,6h、24h、48h、72h조Cx43염색양성면적분별위(8.38±0.16)%、(8.38±0.19)%、(8.39±0.03)%、(8.35±0.15)%,각시상점조Cx43양성표체차이무현저의의,P＞0.05;결양결혈후6h、24h、48h、72h조Cx43염색양성면적분별위(18.64±0.30)%、(29.65±0.26)%、(35.34±0.21)%、(42.05±0.31)%,수착결양결혈후시간적추이,Cx43양성표체축점증가,각조대비,차이유현저의의,P＜0.01;결양결혈조여대조조대비,결양결혈조각시상점Cx43양성표체균고우대조조,P＜0.01;Western-blot결과:각조전영균가현시재43-46KD범위적조대,Cx43/GAPDH전영조대밀도비치대조조6h、24h、48h、72h분별위1.00±0.01、0.99±0.02、1.01±0.01、1.01±0.01;결양결혈조6h、24h、48h、72hCx43/GAPDH전영조대비치분별위1.11±0.04、1.25±0.02、1.37±0.01、1.50±0.01;결양결혈조여대조조대비,동일시상점Cx43단백적표체균교대조조고,P＜0.01;결양결혈6h조Cx43표체이개시증가,수착결양결혈후시간적추이축점증가,지72h조최명현,결양결혈각조간비교,차이유현저의의,P＜0.01;대조조각시상점비교,Cx43단백적표체차이무현저의의,P＞0.05.결론 결양결혈후Cx43적표체축점증가,기변화규률여신경세포조망엄중정도급광경관찰도적뇌손상진전적시간광가상문합.차발생시간조우세포조망,제시Cx43표체적증가삼여료신생대서HIBD적병리형성과정,추측기통과봉극련접증강전파화방대세포손상,재HIBD조기발휘"저매살상효응",도치화가중뇌손해.
