中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
12期
1180-1183
,共4页
汪小瑛%谢剑锋%吴冰珊%蔡少健%沈晓娜%王美爱
汪小瑛%謝劍鋒%吳冰珊%蔡少健%瀋曉娜%王美愛
왕소영%사검봉%오빙산%채소건%침효나%왕미애
登革Ⅱ病毒%分离%鉴定%序列分析%输入性
登革Ⅱ病毒%分離%鑒定%序列分析%輸入性
등혁Ⅱ병독%분리%감정%서렬분석%수입성
目的 对2005年福建省分离的1株登革病毒(DV)进行鉴定,并从分子水平追踪其可能的传染源.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测疑似登革热患者血清中DV-IgM、IgG抗体;同时应用C6/36细胞、单克隆抗体间接免疫荧光(McAb-IFA)、逆转录-套式PCR法分别进行病毒的分离和鉴定,并对分离株的部分基因进行核苷酸序列分析.结果 患者血清登革病毒特异性IgM抗体阳性、IgG抗体可疑,表明该患者在近期感染过登革病毒.患者血清接种C6/36细胞,观察到登革病毒特有的CPE.受感染的C6/36细胞能与登革病毒Ⅱ型单克隆抗体反应,表明分离的病毒株为登革Ⅱ型病毒.分离株的核酸提取物经RT-PCR扩增,登革病毒通用引物可扩增出511bp的特异性条带,型特异性引物扩增出119bp的特异性条带,进一步证实分离的病毒株为登革Ⅱ型病毒.分离株RT-PCR扩增产物的核苷酸序列与30株不同地域来源的登革Ⅱ型病毒相应序列构建的系统发生树表明,此毒株与东南亚地区的毒株比较接近.此次分离株的序列与1999年登革Ⅱ型病毒福建株的对应序列在亲缘关系上有一定程度距离.结合流行病学调查资料,进一步确定此病例为输入性感染病例.结论 福建省首次从输入性登革热患者血清中分离出登革Ⅱ型病毒,该病毒来源于东南亚地区.
目的 對2005年福建省分離的1株登革病毒(DV)進行鑒定,併從分子水平追蹤其可能的傳染源.方法 採用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測疑似登革熱患者血清中DV-IgM、IgG抗體;同時應用C6/36細胞、單剋隆抗體間接免疫熒光(McAb-IFA)、逆轉錄-套式PCR法分彆進行病毒的分離和鑒定,併對分離株的部分基因進行覈苷痠序列分析.結果 患者血清登革病毒特異性IgM抗體暘性、IgG抗體可疑,錶明該患者在近期感染過登革病毒.患者血清接種C6/36細胞,觀察到登革病毒特有的CPE.受感染的C6/36細胞能與登革病毒Ⅱ型單剋隆抗體反應,錶明分離的病毒株為登革Ⅱ型病毒.分離株的覈痠提取物經RT-PCR擴增,登革病毒通用引物可擴增齣511bp的特異性條帶,型特異性引物擴增齣119bp的特異性條帶,進一步證實分離的病毒株為登革Ⅱ型病毒.分離株RT-PCR擴增產物的覈苷痠序列與30株不同地域來源的登革Ⅱ型病毒相應序列構建的繫統髮生樹錶明,此毒株與東南亞地區的毒株比較接近.此次分離株的序列與1999年登革Ⅱ型病毒福建株的對應序列在親緣關繫上有一定程度距離.結閤流行病學調查資料,進一步確定此病例為輸入性感染病例.結論 福建省首次從輸入性登革熱患者血清中分離齣登革Ⅱ型病毒,該病毒來源于東南亞地區.
목적 대2005년복건성분리적1주등혁병독(DV)진행감정,병종분자수평추종기가능적전염원.방법 채용매련면역흡부시험(ELISA)검측의사등혁열환자혈청중DV-IgM、IgG항체;동시응용C6/36세포、단극륭항체간접면역형광(McAb-IFA)、역전록-투식PCR법분별진행병독적분리화감정,병대분리주적부분기인진행핵감산서렬분석.결과 환자혈청등혁병독특이성IgM항체양성、IgG항체가의,표명해환자재근기감염과등혁병독.환자혈청접충C6/36세포,관찰도등혁병독특유적CPE.수감염적C6/36세포능여등혁병독Ⅱ형단극륭항체반응,표명분리적병독주위등혁Ⅱ형병독.분리주적핵산제취물경RT-PCR확증,등혁병독통용인물가확증출511bp적특이성조대,형특이성인물확증출119bp적특이성조대,진일보증실분리적병독주위등혁Ⅱ형병독.분리주RT-PCR확증산물적핵감산서렬여30주불동지역래원적등혁Ⅱ형병독상응서렬구건적계통발생수표명,차독주여동남아지구적독주비교접근.차차분리주적서렬여1999년등혁Ⅱ형병독복건주적대응서렬재친연관계상유일정정도거리.결합류행병학조사자료,진일보학정차병례위수입성감염병례.결론 복건성수차종수입성등혁열환자혈청중분리출등혁Ⅱ형병독,해병독래원우동남아지구.
