CAJ | 학술논문

目的:检测14株肿瘤细胞 P53基因的突变情况. 方法:根据 P53基因5～8外显子之间的内含子序列设计引物,分别对人肺癌、脑胶质瘤、肝癌、胃癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、脉络膜恶性黑素瘤、视网膜成细胞瘤等9种肿瘤14株细胞的 P53基因5、6、7、8的外显子进行PCR扩增反应.琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物;DNA测序,并与正常的DNA序列比较;抽提肿瘤细胞蛋白进行Western blotting检测P53蛋白的表达. 结果:14株肿瘤细胞 P53基因热变区5、6、7、8外显子的扩增产物经电泳鉴定与预期相同.DNA测序结果表明,14株肿瘤细胞中8株存在P53基因5～8外显子的突变,其中肺癌细胞H1299、肝癌细胞Hep3B、肝癌细胞SMMC7721、脉络膜恶性黑素瘤细胞OCM-1检测到以前未报道过的突变;突变主要发生在外显子的编码序列,多数为单个碱基替换导致的错义突变,也有部分表现为同义突变;2株正常细胞未检测到突变.Western blotting检测显示,有基因突变的8株肿瘤细胞中仅6株有P53蛋白表达;所有 P53基因未突变的肿瘤细胞株和正常细胞株均未检测到 P53蛋白. 结论: 检测的14株肿瘤细胞中有8株细胞P53基因热变区存在突变, 其中4株检测到以前未报道过的突变;2株正常细胞未发现P53基因突变.
목적:검측14주종류세포 P53기인적돌변정황. 방법:근거 P53기인5～8외현자지간적내함자서렬설계인물,분별대인폐암、뇌효질류、간암、위암、전렬선암、유선암、결장암、맥락막악성흑소류、시망막성세포류등9충종류14주세포적 P53기인5、6、7、8적외현자진행PCR확증반응.경지당응효전영감정PCR산물;DNA측서,병여정상적DNA서렬비교;추제종류세포단백진행Western blotting검측P53단백적표체. 결과:14주종류세포 P53기인열변구5、6、7、8외현자적확증산물경전영감정여예기상동.DNA측서결과표명,14주종류세포중8주존재P53기인5～8외현자적돌변,기중폐암세포H1299、간암세포Hep3B、간암세포SMMC7721、맥락막악성흑소류세포OCM-1검측도이전미보도과적돌변;돌변주요발생재외현자적편마서렬,다수위단개감기체환도치적착의돌변,야유부분표현위동의돌변;2주정상세포미검측도돌변.Western blotting검측현시,유기인돌변적8주종류세포중부6주유P53단백표체;소유 P53기인미돌변적종류세포주화정상세포주균미검측도 P53단백. 결론: 검측적14주종류세포중유8주세포P53기인열변구존재돌변, 기중4주검측도이전미보도과적돌변;2주정상세포미발현P53기인돌변.