四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2008年
5期
701-705
,共5页
王艳萍%唐小军%周清华%车国卫%陈小禾%朱大兴
王豔萍%唐小軍%週清華%車國衛%陳小禾%硃大興
왕염평%당소군%주청화%차국위%진소화%주대흥
肺癌%自杀基因%端粒酶催化亚单位%靶向性表达
肺癌%自殺基因%耑粒酶催化亞單位%靶嚮性錶達
폐암%자살기인%단립매최화아단위%파향성표체
目的 研究人类单纯疱疹病毒的胸苷激酶(HSV-TK)/更昔洛韦(GCV)治疗系统在人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子的调控下对肺癌细胞A549的体外靶向性增殖抑制作用和对裸鼠体内A549移植瘤的治疗效果.方法 ①用已构建的hTERT启动子和SV40启动子调控的TK基因表达质粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK转染端粒酶阳性的人肺腺癌细胞A549及端粒酶阴性的人胚肺细胞MRC-5,RT-PCR方法检测转染细胞中TK基因的表达情况;②MTT法检测GCV对上述转染细胞体外增殖的抑制作用;并应用流式细胞仪检测GCV对上述转染细胞凋亡的影响;③将A549细胞接种于裸鼠皮下,研究pGL3-hTp-TK/GCV和pGL3-SV40-TK/GCV对移植瘤的体内生长抑制作用.结果 ①转染pGL3-SV40-TK的A549和MRC-5细胞均有TK mRNA表达,转染pGL3-hTp-TK的A549细胞也有TK mRNA表达,但MRC-5细胞无TK mRNA表达;②GCV对转染pGL3-SV40-TK的A549、MRC-5细胞和转染pGL3-hTp-TK的A549细胞的体外增殖均有明显抑制作用,对转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞无明显抑制作用;转染pGL3-SV40-TK 和pGL3-hTp-TK的A549细胞经GCV处理后细胞凋亡指数(分别为21.58%和23.19%)均显著高于转染pGL3-hTp的A549细胞及空白对照, 转染pGL3-SV40-TK的MRC-5细胞凋亡指数(9.35%)显著高于对照组,而转染pGL3-hTp-TK的MRC-5细胞凋亡指数(0.88%)无明显升高;③pGL3-SV40-TK/GCV和pGL3-hTp-TK/GCV治疗系统对裸鼠A549移植瘤的生长具有明显抑制作用,抑瘤率分别为46.7%和40.5%,均显著高于各阴性对照组(分别为9.7%,14.3%,7.0%和8.0%).结论 hTERT启动子可以调控HSV-TK基因在肺癌细胞中靶向性表达,HSV-TK/GCV治疗系统在hTERT启动子调控下对肺癌细胞A549的体外增殖和裸鼠体内的移植瘤生长均有明显的抑制作用.
目的 研究人類單純皰疹病毒的胸苷激酶(HSV-TK)/更昔洛韋(GCV)治療繫統在人耑粒酶催化亞單位(hTERT)啟動子的調控下對肺癌細胞A549的體外靶嚮性增殖抑製作用和對裸鼠體內A549移植瘤的治療效果.方法 ①用已構建的hTERT啟動子和SV40啟動子調控的TK基因錶達質粒pGL3-hTp-TK和pGL3-SV40-TK轉染耑粒酶暘性的人肺腺癌細胞A549及耑粒酶陰性的人胚肺細胞MRC-5,RT-PCR方法檢測轉染細胞中TK基因的錶達情況;②MTT法檢測GCV對上述轉染細胞體外增殖的抑製作用;併應用流式細胞儀檢測GCV對上述轉染細胞凋亡的影響;③將A549細胞接種于裸鼠皮下,研究pGL3-hTp-TK/GCV和pGL3-SV40-TK/GCV對移植瘤的體內生長抑製作用.結果 ①轉染pGL3-SV40-TK的A549和MRC-5細胞均有TK mRNA錶達,轉染pGL3-hTp-TK的A549細胞也有TK mRNA錶達,但MRC-5細胞無TK mRNA錶達;②GCV對轉染pGL3-SV40-TK的A549、MRC-5細胞和轉染pGL3-hTp-TK的A549細胞的體外增殖均有明顯抑製作用,對轉染pGL3-hTp-TK的MRC-5細胞無明顯抑製作用;轉染pGL3-SV40-TK 和pGL3-hTp-TK的A549細胞經GCV處理後細胞凋亡指數(分彆為21.58%和23.19%)均顯著高于轉染pGL3-hTp的A549細胞及空白對照, 轉染pGL3-SV40-TK的MRC-5細胞凋亡指數(9.35%)顯著高于對照組,而轉染pGL3-hTp-TK的MRC-5細胞凋亡指數(0.88%)無明顯升高;③pGL3-SV40-TK/GCV和pGL3-hTp-TK/GCV治療繫統對裸鼠A549移植瘤的生長具有明顯抑製作用,抑瘤率分彆為46.7%和40.5%,均顯著高于各陰性對照組(分彆為9.7%,14.3%,7.0%和8.0%).結論 hTERT啟動子可以調控HSV-TK基因在肺癌細胞中靶嚮性錶達,HSV-TK/GCV治療繫統在hTERT啟動子調控下對肺癌細胞A549的體外增殖和裸鼠體內的移植瘤生長均有明顯的抑製作用.
목적 연구인류단순포진병독적흉감격매(HSV-TK)/경석락위(GCV)치료계통재인단립매최화아단위(hTERT)계동자적조공하대폐암세포A549적체외파향성증식억제작용화대라서체내A549이식류적치료효과.방법 ①용이구건적hTERT계동자화SV40계동자조공적TK기인표체질립pGL3-hTp-TK화pGL3-SV40-TK전염단립매양성적인폐선암세포A549급단립매음성적인배폐세포MRC-5,RT-PCR방법검측전염세포중TK기인적표체정황;②MTT법검측GCV대상술전염세포체외증식적억제작용;병응용류식세포의검측GCV대상술전염세포조망적영향;③장A549세포접충우라서피하,연구pGL3-hTp-TK/GCV화pGL3-SV40-TK/GCV대이식류적체내생장억제작용.결과 ①전염pGL3-SV40-TK적A549화MRC-5세포균유TK mRNA표체,전염pGL3-hTp-TK적A549세포야유TK mRNA표체,단MRC-5세포무TK mRNA표체;②GCV대전염pGL3-SV40-TK적A549、MRC-5세포화전염pGL3-hTp-TK적A549세포적체외증식균유명현억제작용,대전염pGL3-hTp-TK적MRC-5세포무명현억제작용;전염pGL3-SV40-TK 화pGL3-hTp-TK적A549세포경GCV처리후세포조망지수(분별위21.58%화23.19%)균현저고우전염pGL3-hTp적A549세포급공백대조, 전염pGL3-SV40-TK적MRC-5세포조망지수(9.35%)현저고우대조조,이전염pGL3-hTp-TK적MRC-5세포조망지수(0.88%)무명현승고;③pGL3-SV40-TK/GCV화pGL3-hTp-TK/GCV치료계통대라서A549이식류적생장구유명현억제작용,억류솔분별위46.7%화40.5%,균현저고우각음성대조조(분별위9.7%,14.3%,7.0%화8.0%).결론 hTERT계동자가이조공HSV-TK기인재폐암세포중파향성표체,HSV-TK/GCV치료계통재hTERT계동자조공하대폐암세포A549적체외증식화라서체내적이식류생장균유명현적억제작용.
