新疆医科大学学报
新疆醫科大學學報
신강의과대학학보
JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY
2010年
6期
600-603
,共4页
孙丽丽%焦谊%王延蛟%刘晓宇%张成%关亚群
孫麗麗%焦誼%王延蛟%劉曉宇%張成%關亞群
손려려%초의%왕연교%류효우%장성%관아군
内脂素%3T3-L1前脂肪细胞%逆转录-聚合酶链反应%免疫印迹%肥胖
內脂素%3T3-L1前脂肪細胞%逆轉錄-聚閤酶鏈反應%免疫印跡%肥胖
내지소%3T3-L1전지방세포%역전록-취합매련반응%면역인적%비반
目的 观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程的不同时段内脂素基因表达水平的变化,探讨内脂素基因与脂肪细胞分化、脂质积聚之间的关系.方法 体外培养3T3-L1前脂肪细胞,在该细胞生长至完全汇合(confluent)后2 d,采用经典的鸡尾酒方法诱导其分化,并于诱导分化过程中用油红O染色鉴定脂肪细胞分化情况,采用RT-PCR和Western blot技术检测内脂素基因表达的变化规律.结果 油红O染色显示,细胞内脂滴逐渐增大、增多,至分化末期占视野90%以上.内脂素基因在诱导分化初期不表达,分化第2天开始表达,分化第4~8天表达显著上调,分化至第10~12天,内脂素基因表达保持在较高水平并趋于稳定.其中,诱导分化后第6~12天较分化第0天显著升高(P<0.05),诱导分化第10~12天较第2~6天显著升高,诱导分化第12天较第6~8天显著升高(P<0.05).Western blot方法检测结果显示,随细胞分化成熟内脂素蛋白表达水平逐渐升高.结论 内脂素基因与脂肪细胞分化和脂质积聚有密切的关系.
目的 觀察3T3-L1前脂肪細胞誘導分化過程的不同時段內脂素基因錶達水平的變化,探討內脂素基因與脂肪細胞分化、脂質積聚之間的關繫.方法 體外培養3T3-L1前脂肪細胞,在該細胞生長至完全彙閤(confluent)後2 d,採用經典的鷄尾酒方法誘導其分化,併于誘導分化過程中用油紅O染色鑒定脂肪細胞分化情況,採用RT-PCR和Western blot技術檢測內脂素基因錶達的變化規律.結果 油紅O染色顯示,細胞內脂滴逐漸增大、增多,至分化末期佔視野90%以上.內脂素基因在誘導分化初期不錶達,分化第2天開始錶達,分化第4~8天錶達顯著上調,分化至第10~12天,內脂素基因錶達保持在較高水平併趨于穩定.其中,誘導分化後第6~12天較分化第0天顯著升高(P<0.05),誘導分化第10~12天較第2~6天顯著升高,誘導分化第12天較第6~8天顯著升高(P<0.05).Western blot方法檢測結果顯示,隨細胞分化成熟內脂素蛋白錶達水平逐漸升高.結論 內脂素基因與脂肪細胞分化和脂質積聚有密切的關繫.
목적 관찰3T3-L1전지방세포유도분화과정적불동시단내지소기인표체수평적변화,탐토내지소기인여지방세포분화、지질적취지간적관계.방법 체외배양3T3-L1전지방세포,재해세포생장지완전회합(confluent)후2 d,채용경전적계미주방법유도기분화,병우유도분화과정중용유홍O염색감정지방세포분화정황,채용RT-PCR화Western blot기술검측내지소기인표체적변화규률.결과 유홍O염색현시,세포내지적축점증대、증다,지분화말기점시야90%이상.내지소기인재유도분화초기불표체,분화제2천개시표체,분화제4~8천표체현저상조,분화지제10~12천,내지소기인표체보지재교고수평병추우은정.기중,유도분화후제6~12천교분화제0천현저승고(P<0.05),유도분화제10~12천교제2~6천현저승고,유도분화제12천교제6~8천현저승고(P<0.05).Western blot방법검측결과현시,수세포분화성숙내지소단백표체수평축점승고.결론 내지소기인여지방세포분화화지질적취유밀절적관계.