CAJ | 학술논문

目的:ZZ亲和肽是源于葡萄球菌蛋白A的人工合成序列,能结合IgG抗体Fc段,在免疫学领域具有广泛的应用价值.本研究利用大肠杆菌表达C端带有6×His标签的ZZ亲和肽,并测定其生物学活性.方法:以pEZZ18为模板PCR扩增ZZ亲和肽基因,克隆至pUC18载体的EcoRⅠ/Hind Ⅲ位点构建pUC-ZZ表达载体.利用大肠杆菌表达C端带有6×His的ZZ亲和肽,表达产物经Ni亲和层析纯化,利用竞争ELISA测定其与IgG抗体的亲和活性.结果:成功构建pUC-ZZ表达载体,SDS-PAGE显示ZZ亲和肽的Mr为16×103,与兔IgG抗体相对亲和常数为Ka≌1.45×108 L/mol.结论:ZZ亲和肽基因成功在大肠杆菌中表达,具有与IgG抗体结合活性,为ZZ亲和肽的进一步开发利用奠定了基础.
목적:ZZ친화태시원우포도구균단백A적인공합성서렬,능결합IgG항체Fc단,재면역학영역구유엄범적응용개치.본연구이용대장간균표체C단대유6×His표첨적ZZ친화태,병측정기생물학활성.방법:이pEZZ18위모판PCR확증ZZ친화태기인,극륭지pUC18재체적EcoRⅠ/Hind Ⅲ위점구건pUC-ZZ표체재체.이용대장간균표체C단대유6×His적ZZ친화태,표체산물경Ni친화층석순화,이용경쟁ELISA측정기여IgG항체적친화활성.결과:성공구건pUC-ZZ표체재체,SDS-PAGE현시ZZ친화태적Mr위16×103,여토IgG항체상대친화상수위Ka≌1.45×108 L/mol.결론:ZZ친화태기인성공재대장간균중표체,구유여IgG항체결합활성,위ZZ친화태적진일보개발이용전정료기출.