中南民族大学学报（自然科学版）
中南民族大學學報（自然科學版）
중남민족대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SOUTH-CENTRAL UNIVERSITY FOR NATIONALITIES(NATURAL SCIENCE EDITION)
2011年
2期
28-32
,共5页
沈静茹%韦康%余学红%茶永军
瀋靜茹%韋康%餘學紅%茶永軍
침정여%위강%여학홍%다영군
重组融合蛋白%分离纯化%聚乙二醇天冬氨酸修饰物%液-固萃取
重組融閤蛋白%分離純化%聚乙二醇天鼕氨痠脩飾物%液-固萃取
중조융합단백%분리순화%취을이순천동안산수식물%액-고췌취
以工程菌中被绿色荧光蛋白修饰的基因重组蛋白为对象,构建了聚乙二醇天冬氨酸修饰物PEG-ASP-Cu(Ⅱ)混合曲拉通X-100-硫酸盐-水液-固萃取体系纯化该融合蛋白.探讨了在体系中适用的表征目标蛋白的荧光方法,通过实验确定了采用恒波长同步荧光法测定日标蛋白质,可排除萃取体系中其他因素,尤其曲拉通X-100对目标蛋白测定的影响,得出最件测定条件.通过验证可知该萃取体系对目标蛋白最佳正萃分离条件和最佳反萃条件.结果表明:未加入修饰物的单纯液-固萃取体系对目标蛋白萃取固相收得率在50％～89％;加入修饰物后,体系对目标蛋白的一次萃取固相收得率提升并稳定在97％以上,最高达100％,一次反萃取率达68％.
以工程菌中被綠色熒光蛋白脩飾的基因重組蛋白為對象,構建瞭聚乙二醇天鼕氨痠脩飾物PEG-ASP-Cu(Ⅱ)混閤麯拉通X-100-硫痠鹽-水液-固萃取體繫純化該融閤蛋白.探討瞭在體繫中適用的錶徵目標蛋白的熒光方法,通過實驗確定瞭採用恆波長同步熒光法測定日標蛋白質,可排除萃取體繫中其他因素,尤其麯拉通X-100對目標蛋白測定的影響,得齣最件測定條件.通過驗證可知該萃取體繫對目標蛋白最佳正萃分離條件和最佳反萃條件.結果錶明:未加入脩飾物的單純液-固萃取體繫對目標蛋白萃取固相收得率在50％～89％;加入脩飾物後,體繫對目標蛋白的一次萃取固相收得率提升併穩定在97％以上,最高達100％,一次反萃取率達68％.
이공정균중피록색형광단백수식적기인중조단백위대상,구건료취을이순천동안산수식물PEG-ASP-Cu(Ⅱ)혼합곡랍통X-100-류산염-수액-고췌취체계순화해융합단백.탐토료재체계중괄용적표정목표단백적형광방법,통과실험학정료채용항파장동보형광법측정일표단백질,가배제췌취체계중기타인소,우기곡랍통X-100대목표단백측정적영향,득출최건측정조건.통과험증가지해췌취체계대목표단백최가정췌분리조건화최가반췌조건.결과표명:미가입수식물적단순액-고췌취체계대목표단백췌취고상수득솔재50％～89％;가입수식물후,체계대목표단백적일차췌취고상수득솔제승병은정재97％이상,최고체100％,일차반췌취솔체68％.
