中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
21期
183-188
,共6页
周利伟%郜赵伟%张宇宏%张伟
週利偉%郜趙偉%張宇宏%張偉
주리위%고조위%장우굉%장위
葡萄糖氧化酶%高通量筛选%毕赤酵母
葡萄糖氧化酶%高通量篩選%畢赤酵母
포도당양화매%고통량사선%필적효모
为了建立一种高通量快速筛选重组葡萄糖氧化酶(GOD)毕赤酵母高产菌株的方法,转god基因毕赤酵母重组子在MM平板上培养,经甲醇诱导培养2天后在平板上覆盖显色液,室温显色30 min,测定棕色圈直径并计算面积,然后评估棕色圈面积与GOD活力的相关性.室温显色30min后,当样品的GOD活力大于0.0005 U时,平板上可观察到明显的棕色圈；经过与传统液体培养筛选方法的比较验证,该平板筛选方法灵敏度高,稳定性和重复性好,筛选结果与传统方法一致；并且当毕赤酵母重组子表达的GOD活力介于0～0.1 U/mL的范围内时,显色圈的绝对面积与GOD活力相关系数可达0.63.本研究成功地建立了一种转葡萄糖氧化酶基因毕赤酵母重组菌株的高通量快速筛选方法.
為瞭建立一種高通量快速篩選重組葡萄糖氧化酶(GOD)畢赤酵母高產菌株的方法,轉god基因畢赤酵母重組子在MM平闆上培養,經甲醇誘導培養2天後在平闆上覆蓋顯色液,室溫顯色30 min,測定棕色圈直徑併計算麵積,然後評估棕色圈麵積與GOD活力的相關性.室溫顯色30min後,噹樣品的GOD活力大于0.0005 U時,平闆上可觀察到明顯的棕色圈；經過與傳統液體培養篩選方法的比較驗證,該平闆篩選方法靈敏度高,穩定性和重複性好,篩選結果與傳統方法一緻；併且噹畢赤酵母重組子錶達的GOD活力介于0～0.1 U/mL的範圍內時,顯色圈的絕對麵積與GOD活力相關繫數可達0.63.本研究成功地建立瞭一種轉葡萄糖氧化酶基因畢赤酵母重組菌株的高通量快速篩選方法.
위료건립일충고통량쾌속사선중조포도당양화매(GOD)필적효모고산균주적방법,전god기인필적효모중조자재MM평판상배양,경갑순유도배양2천후재평판상복개현색액,실온현색30 min,측정종색권직경병계산면적,연후평고종색권면적여GOD활력적상관성.실온현색30min후,당양품적GOD활력대우0.0005 U시,평판상가관찰도명현적종색권；경과여전통액체배양사선방법적비교험증,해평판사선방법령민도고,은정성화중복성호,사선결과여전통방법일치；병차당필적효모중조자표체적GOD활력개우0～0.1 U/mL적범위내시,현색권적절대면적여GOD활력상관계수가체0.63.본연구성공지건립료일충전포도당양화매기인필적효모중조균주적고통량쾌속사선방법.
