复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY
2004年
5期
441-444
,共4页
罗育坤%梁春%黄东%许从峰%贾庆哲%王克强%葛均波
囉育坤%樑春%黃東%許從峰%賈慶哲%王剋彊%葛均波
라육곤%량춘%황동%허종봉%가경철%왕극강%갈균파
树突状细胞%动脉粥样硬化%氧化低密度脂蛋白%免疫
樹突狀細胞%動脈粥樣硬化%氧化低密度脂蛋白%免疫
수돌상세포%동맥죽양경화%양화저밀도지단백%면역
目的探讨氧化修饰低密度脂蛋白(oxidized-low density lipoprotein,oxLDL)和低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)对人单核细胞源的树突状细胞(monocyte derived dendritic cells,MDCs)免疫功能的影响.方法采用免疫磁珠法分离人外周血CD14+单核细胞,经含rhGM-CSF(100ng/mL)和rhIL-4(20ng/mL)的Cell-gro培养,使其分化为MDCs.分别以PBS和LPS(500μg/mL)作阴性和阳性(成熟)对照,观察经50μg/mL的oxLDL和LDL干预48 h后,流式细胞术检测MDCs表型(CD1a、CD40、CD86、HLA-DR),混合T淋巴细胞反应检测MDCs对淋巴细胞增殖的影响,FITC-Dextran检测MDCs吞噬功能,ELISA检测细胞培养上清细胞因子(IL-12、IL-10和TNF-α)浓度.结果与PBS相比,50 μg/mL oxLDL干预的MDCs,不但可明显上调共刺激分子CD86的高表达,而且反映MDCs成熟程度的CD1a也表达增强,与此同时经oxLDL处理的MDCs吞噬作用却明显减弱,进一步的混合T淋巴细胞反应显示经过oxLDL刺激的MDCs促T细胞增殖作用明显增强(P＜0.05);此外,oxLDL可明显促进MDC分泌细胞因子TNF-α、IL-10和IL-12(P＜0.05),但明显弱于LPS组,而LDL无此作用.结论oxLDL在促进DCs成熟的同时,DCs激活T淋巴细胞的能力也明显增强.此外oxLDL还可直接通过促进DCs本身释放一些炎症因子,加速和放大炎症免疫反应.这可能是DCs参与动脉粥样硬化炎症免疫反应发生的重要机制之一.
目的探討氧化脩飾低密度脂蛋白(oxidized-low density lipoprotein,oxLDL)和低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)對人單覈細胞源的樹突狀細胞(monocyte derived dendritic cells,MDCs)免疫功能的影響.方法採用免疫磁珠法分離人外週血CD14+單覈細胞,經含rhGM-CSF(100ng/mL)和rhIL-4(20ng/mL)的Cell-gro培養,使其分化為MDCs.分彆以PBS和LPS(500μg/mL)作陰性和暘性(成熟)對照,觀察經50μg/mL的oxLDL和LDL榦預48 h後,流式細胞術檢測MDCs錶型(CD1a、CD40、CD86、HLA-DR),混閤T淋巴細胞反應檢測MDCs對淋巴細胞增殖的影響,FITC-Dextran檢測MDCs吞噬功能,ELISA檢測細胞培養上清細胞因子(IL-12、IL-10和TNF-α)濃度.結果與PBS相比,50 μg/mL oxLDL榦預的MDCs,不但可明顯上調共刺激分子CD86的高錶達,而且反映MDCs成熟程度的CD1a也錶達增彊,與此同時經oxLDL處理的MDCs吞噬作用卻明顯減弱,進一步的混閤T淋巴細胞反應顯示經過oxLDL刺激的MDCs促T細胞增殖作用明顯增彊(P＜0.05);此外,oxLDL可明顯促進MDC分泌細胞因子TNF-α、IL-10和IL-12(P＜0.05),但明顯弱于LPS組,而LDL無此作用.結論oxLDL在促進DCs成熟的同時,DCs激活T淋巴細胞的能力也明顯增彊.此外oxLDL還可直接通過促進DCs本身釋放一些炎癥因子,加速和放大炎癥免疫反應.這可能是DCs參與動脈粥樣硬化炎癥免疫反應髮生的重要機製之一.
목적탐토양화수식저밀도지단백(oxidized-low density lipoprotein,oxLDL)화저밀도지단백(low density lipoprotein,LDL)대인단핵세포원적수돌상세포(monocyte derived dendritic cells,MDCs)면역공능적영향.방법채용면역자주법분리인외주혈CD14+단핵세포,경함rhGM-CSF(100ng/mL)화rhIL-4(20ng/mL)적Cell-gro배양,사기분화위MDCs.분별이PBS화LPS(500μg/mL)작음성화양성(성숙)대조,관찰경50μg/mL적oxLDL화LDL간예48 h후,류식세포술검측MDCs표형(CD1a、CD40、CD86、HLA-DR),혼합T림파세포반응검측MDCs대림파세포증식적영향,FITC-Dextran검측MDCs탄서공능,ELISA검측세포배양상청세포인자(IL-12、IL-10화TNF-α)농도.결과여PBS상비,50 μg/mL oxLDL간예적MDCs,불단가명현상조공자격분자CD86적고표체,이차반영MDCs성숙정도적CD1a야표체증강,여차동시경oxLDL처리적MDCs탄서작용각명현감약,진일보적혼합T림파세포반응현시경과oxLDL자격적MDCs촉T세포증식작용명현증강(P＜0.05);차외,oxLDL가명현촉진MDC분비세포인자TNF-α、IL-10화IL-12(P＜0.05),단명현약우LPS조,이LDL무차작용.결론oxLDL재촉진DCs성숙적동시,DCs격활T림파세포적능력야명현증강.차외oxLDL환가직접통과촉진DCs본신석방일사염증인자,가속화방대염증면역반응.저가능시DCs삼여동맥죽양경화염증면역반응발생적중요궤제지일.
