重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2007年
6期
568-570,587
,共4页
吴明军%毕杨%黄佳档%赵迎泽%何通川%冯涛
吳明軍%畢楊%黃佳檔%趙迎澤%何通川%馮濤
오명군%필양%황가당%조영택%하통천%풍도
HBx基因%逆转录病毒载体%PCR%Western Blotting
HBx基因%逆轉錄病毒載體%PCR%Western Blotting
HBx기인%역전록병독재체%PCR%Western Blotting
目的:构建携带HBx基因的重组逆转录病毒载体,为进一步研究HBx基因在HBV相关性HCC(原发性肝癌)发病机制中的作用以及建立肝癌动物模型奠定基础.方法:根据基因库中已公布的HBx序列设计引物,采用PCR技术从HBx腺病毒质粒中扩增出HBx基因.将HBx基因克隆到逆转录病毒载体pSEB-HUS质粒中.酶切、PCR及测序鉴定后经脂质体介导转染L02细胞,Western Blotting检测HBx蛋白的表达.结果:PCR、酶切及测序鉴定证实目的基因正确克隆至逆转录病毒质粒pSEB-HUS中,目的基因序列与GENE BANK报道一致,转染L02细胞后荧光显微镜可观察到GFP的表达.Western Blotting检测可见HBx蛋白的表达.结论:成功构建HBx重组逆转录病毒载体.
目的:構建攜帶HBx基因的重組逆轉錄病毒載體,為進一步研究HBx基因在HBV相關性HCC(原髮性肝癌)髮病機製中的作用以及建立肝癌動物模型奠定基礎.方法:根據基因庫中已公佈的HBx序列設計引物,採用PCR技術從HBx腺病毒質粒中擴增齣HBx基因.將HBx基因剋隆到逆轉錄病毒載體pSEB-HUS質粒中.酶切、PCR及測序鑒定後經脂質體介導轉染L02細胞,Western Blotting檢測HBx蛋白的錶達.結果:PCR、酶切及測序鑒定證實目的基因正確剋隆至逆轉錄病毒質粒pSEB-HUS中,目的基因序列與GENE BANK報道一緻,轉染L02細胞後熒光顯微鏡可觀察到GFP的錶達.Western Blotting檢測可見HBx蛋白的錶達.結論:成功構建HBx重組逆轉錄病毒載體.
목적:구건휴대HBx기인적중조역전록병독재체,위진일보연구HBx기인재HBV상관성HCC(원발성간암)발병궤제중적작용이급건립간암동물모형전정기출.방법:근거기인고중이공포적HBx서렬설계인물,채용PCR기술종HBx선병독질립중확증출HBx기인.장HBx기인극륭도역전록병독재체pSEB-HUS질립중.매절、PCR급측서감정후경지질체개도전염L02세포,Western Blotting검측HBx단백적표체.결과:PCR、매절급측서감정증실목적기인정학극륭지역전록병독질립pSEB-HUS중,목적기인서렬여GENE BANK보도일치,전염L02세포후형광현미경가관찰도GFP적표체.Western Blotting검측가견HBx단백적표체.결론:성공구건HBx중조역전록병독재체.
