科学技术与工程
科學技術與工程
과학기술여공정
SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
2007年
13期
3077-3080
,共4页
王丽%陈苏民%陈南春%黄勇
王麗%陳囌民%陳南春%黃勇
왕려%진소민%진남춘%황용
酸水解%密码子%基因表达
痠水解%密碼子%基因錶達
산수해%밀마자%기인표체
通过调整表达翻译肽链中段Asp-Pro-Pro三个氨基酸的密码子的序列,观察其对目的蛋白在大肠杆菌中表达的影响.用PCR方法分别在rhBMP4-m基因的5'端加上编码Asp-Pro-Pro酸水解肽的不同简并码序列,克隆入原核融合表达载体pRSET中进行诱导表达,SDS-PAGE分析,观察融合蛋白的表达效果.成功构建9个不同简并码序列的融合表达载体;经诱导表达分析,只有在两个脯氨酸的密码子均为CCG时,融合蛋白才能正常表达,说明改变表达肽链中段氨基酸密码子的碱基序列可以影响融合蛋白的表达效果.
通過調整錶達翻譯肽鏈中段Asp-Pro-Pro三箇氨基痠的密碼子的序列,觀察其對目的蛋白在大腸桿菌中錶達的影響.用PCR方法分彆在rhBMP4-m基因的5'耑加上編碼Asp-Pro-Pro痠水解肽的不同簡併碼序列,剋隆入原覈融閤錶達載體pRSET中進行誘導錶達,SDS-PAGE分析,觀察融閤蛋白的錶達效果.成功構建9箇不同簡併碼序列的融閤錶達載體;經誘導錶達分析,隻有在兩箇脯氨痠的密碼子均為CCG時,融閤蛋白纔能正常錶達,說明改變錶達肽鏈中段氨基痠密碼子的堿基序列可以影響融閤蛋白的錶達效果.
통과조정표체번역태련중단Asp-Pro-Pro삼개안기산적밀마자적서렬,관찰기대목적단백재대장간균중표체적영향.용PCR방법분별재rhBMP4-m기인적5'단가상편마Asp-Pro-Pro산수해태적불동간병마서렬,극륭입원핵융합표체재체pRSET중진행유도표체,SDS-PAGE분석,관찰융합단백적표체효과.성공구건9개불동간병마서렬적융합표체재체;경유도표체분석,지유재량개포안산적밀마자균위CCG시,융합단백재능정상표체,설명개변표체태련중단안기산밀마자적감기서렬가이영향융합단백적표체효과.
