西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2007年
8期
180-184
,共5页
HLA-G%原核表达%重组蛋白%包涵体
HLA-G%原覈錶達%重組蛋白%包涵體
HLA-G%원핵표체%중조단백%포함체
为了进一步在蛋白质水平对人白细胞抗原HLA-G进行分析,利用已经构建好的克隆质粒pGEM-THLA-G1,进一步构建了重组原核表达质粒pET28a-sHLA-G1.SDS-PAGE检测表明,重组蛋白sHLA-G1在大肠杆菌(E. coli)中得到稳定表达,原核表达的重组蛋白sHLA-G1主要以包涵体形式存在.包涵体蛋白经充分洗涤、尿素溶解后用钴离子树脂纯化,并用SDS-PAGE和Western印迹进行了分析,鉴定结果表明,该蛋白纯度达到90%以上,并能与HLA-G特异性抗体87G反应.该研究结果为进一步的复性工作奠定了基础.
為瞭進一步在蛋白質水平對人白細胞抗原HLA-G進行分析,利用已經構建好的剋隆質粒pGEM-THLA-G1,進一步構建瞭重組原覈錶達質粒pET28a-sHLA-G1.SDS-PAGE檢測錶明,重組蛋白sHLA-G1在大腸桿菌(E. coli)中得到穩定錶達,原覈錶達的重組蛋白sHLA-G1主要以包涵體形式存在.包涵體蛋白經充分洗滌、尿素溶解後用鈷離子樹脂純化,併用SDS-PAGE和Western印跡進行瞭分析,鑒定結果錶明,該蛋白純度達到90%以上,併能與HLA-G特異性抗體87G反應.該研究結果為進一步的複性工作奠定瞭基礎.
위료진일보재단백질수평대인백세포항원HLA-G진행분석,이용이경구건호적극륭질립pGEM-THLA-G1,진일보구건료중조원핵표체질립pET28a-sHLA-G1.SDS-PAGE검측표명,중조단백sHLA-G1재대장간균(E. coli)중득도은정표체,원핵표체적중조단백sHLA-G1주요이포함체형식존재.포함체단백경충분세조、뇨소용해후용고리자수지순화,병용SDS-PAGE화Western인적진행료분석,감정결과표명,해단백순도체도90%이상,병능여HLA-G특이성항체87G반응.해연구결과위진일보적복성공작전정료기출.
