畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2007年
10期
1072-1076
,共5页
陈国华%景志忠%窦永喜%蒙学莲%张巧颖%宋世斌
陳國華%景誌忠%竇永喜%矇學蓮%張巧穎%宋世斌
진국화%경지충%두영희%몽학련%장교영%송세빈
猪白细胞介素4%重组表达%纯化%活性分析
豬白細胞介素4%重組錶達%純化%活性分析
저백세포개소4%중조표체%순화%활성분석
用已构建好的重组表达载体pGEX-4T-IL-4转染E.coli,在最适条件下诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出38 ku的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的25%,表达产物主要以包涵体的形式存在;对表达产物经变性、复性及初步纯化后再结合饱和硫酸铵沉淀和Sephadex-G100凝胶层析柱进一步纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上.在体外利用MTT法检测其生物学特性,结果表明其具有较好的生物学活性,本试验为获得猪IL-4重组蛋白奠定了基础.
用已構建好的重組錶達載體pGEX-4T-IL-4轉染E.coli,在最適條件下誘導錶達,錶達產物經SDS-PAGE分析,錶達齣38 ku的融閤蛋白,錶達量佔菌體總蛋白的25%,錶達產物主要以包涵體的形式存在;對錶達產物經變性、複性及初步純化後再結閤飽和硫痠銨沉澱和Sephadex-G100凝膠層析柱進一步純化,所得蛋白的純度約在90%以上.在體外利用MTT法檢測其生物學特性,結果錶明其具有較好的生物學活性,本試驗為穫得豬IL-4重組蛋白奠定瞭基礎.
용이구건호적중조표체재체pGEX-4T-IL-4전염E.coli,재최괄조건하유도표체,표체산물경SDS-PAGE분석,표체출38 ku적융합단백,표체량점균체총단백적25%,표체산물주요이포함체적형식존재;대표체산물경변성、복성급초보순화후재결합포화류산안침정화Sephadex-G100응효층석주진일보순화,소득단백적순도약재90%이상.재체외이용MTT법검측기생물학특성,결과표명기구유교호적생물학활성,본시험위획득저IL-4중조단백전정료기출.
