山西大学学报（自然科学版）
山西大學學報（自然科學版）
산서대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANXI UNIVERSITY
2008年
2期
258-261
,共4页
Escherichia coli二硫键异构酶DsbC%原核表达%二聚体%氧化还原活性%辣根过氧化物酶(HRP)重折叠
Escherichia coli二硫鍵異構酶DsbC%原覈錶達%二聚體%氧化還原活性%辣根過氧化物酶(HRP)重摺疊
Escherichia coli이류건이구매DsbC%원핵표체%이취체%양화환원활성%랄근과양화물매(HRP)중절첩
将大肠杆菌二硫键异构酶DsbC基因克隆到表达载体pRSETc中,并在宿主菌E.coli BL21(DE3)中通过IPTG诱导进行可溶性表达.用Ni-NTA亲和层析柱从菌体裂解液中纯化了His6-DsbC,通过Superdex 75凝胶过滤层析获得纯His6-DsbC蛋白.Western blot和凝胶过滤层析分析表明,该蛋白以二聚体的形式存在.通过RP-HPLC分析,表达的His6-DsbC以氧化型和还原型存在,并且该两种形态在一定的氧化还原体系中能够相互转化.HRP重折叠实验说明,重组DsbC能够提高HRP的复性率.
將大腸桿菌二硫鍵異構酶DsbC基因剋隆到錶達載體pRSETc中,併在宿主菌E.coli BL21(DE3)中通過IPTG誘導進行可溶性錶達.用Ni-NTA親和層析柱從菌體裂解液中純化瞭His6-DsbC,通過Superdex 75凝膠過濾層析穫得純His6-DsbC蛋白.Western blot和凝膠過濾層析分析錶明,該蛋白以二聚體的形式存在.通過RP-HPLC分析,錶達的His6-DsbC以氧化型和還原型存在,併且該兩種形態在一定的氧化還原體繫中能夠相互轉化.HRP重摺疊實驗說明,重組DsbC能夠提高HRP的複性率.
장대장간균이류건이구매DsbC기인극륭도표체재체pRSETc중,병재숙주균E.coli BL21(DE3)중통과IPTG유도진행가용성표체.용Ni-NTA친화층석주종균체렬해액중순화료His6-DsbC,통과Superdex 75응효과려층석획득순His6-DsbC단백.Western blot화응효과려층석분석표명,해단백이이취체적형식존재.통과RP-HPLC분석,표체적His6-DsbC이양화형화환원형존재,병차해량충형태재일정적양화환원체계중능구상호전화.HRP중절첩실험설명,중조DsbC능구제고HRP적복성솔.
