CAJ | 학술논문

目的:观察醛固酮对培养心肌细胞表达肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响.方法:在原代培养的新生大鼠心肌细胞,采用免疫组化和RT-PCR,评价10-6M、10-5M醛固酮及10-5M醛固酮拮抗剂螺内酯对心肌细胞表达TNF-α的影响.用凝胶滞留实验(EMSA)验证NF-κB是否参与TNF-α的转录调控,筛选TNF-α可能启动子的位点.结果:TNF-α的免疫组化染色在对照组心肌细胞呈阴性,10-5和10-6M醛固酮作用心肌细胞48h,心肌细胞胞浆中出现棕色颗粒,10-5M醛固酮与螺内酯共同孵育的心肌细胞内TNF-α染色呈阴性.与单纯培养的对照组心肌细胞相比,10-5M,10-6醛固酮刺激心肌细胞24h致心肌细胞TNF-α表达的mRNA显著增高,与螺内酯共同堵养的心肌细胞中TNF-αmRNA水平与对照组相比没有明显差异.醛固酮组心肌细胞的核蛋白与TNF-α上游含有潜在NF-αB结合位点的2段寡核苷酸(-619～-591 and-508～481)的结合强于对照组,螺内酯能阻断这一效应.结论:正常情况下培养的新生鼠心肌细胞内无TNF-α合成,醛固酮通过醛固酮受体促使培养的心肌细胞表达TNF-α,NF-κB核转移是醛固酮激活心肌细胞表达TNF-α的一条通路.
목적:관찰철고동대배양심기세포표체종류배사인자(TNF-α)적영향.방법:재원대배양적신생대서심기세포,채용면역조화화RT-PCR,평개10-6M、10-5M철고동급10-5M철고동길항제라내지대심기세포표체TNF-α적영향.용응효체류실험(EMSA)험증NF-κB시부삼여TNF-α적전록조공,사선TNF-α가능계동자적위점.결과:TNF-α적면역조화염색재대조조심기세포정음성,10-5화10-6M철고동작용심기세포48h,심기세포포장중출현종색과립,10-5M철고동여라내지공동부육적심기세포내TNF-α염색정음성.여단순배양적대조조심기세포상비,10-5M,10-6철고동자격심기세포24h치심기세포TNF-α표체적mRNA현저증고,여라내지공동도양적심기세포중TNF-αmRNA수평여대조조상비몰유명현차이.철고동조심기세포적핵단백여TNF-α상유함유잠재NF-αB결합위점적2단과핵감산(-619～-591 and-508～481)적결합강우대조조,라내지능조단저일효응.결론:정상정황하배양적신생서심기세포내무TNF-α합성,철고동통과철고동수체촉사배양적심기세포표체TNF-α,NF-κB핵전이시철고동격활심기세포표체TNF-α적일조통로.