安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
35期
15364-15366
,共3页
赵微%李久纯%巴彩凤%苏荣健%苏玉虹
趙微%李久純%巴綵鳳%囌榮健%囌玉虹
조미%리구순%파채봉%소영건%소옥홍
猪%CFL2b基因%基因表达定位%C2C12细胞%pEGFP-N1
豬%CFL2b基因%基因錶達定位%C2C12細胞%pEGFP-N1
저%CFL2b기인%기인표체정위%C2C12세포%pEGFP-N1
[目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位.[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体.然后经真核表达质粒脂质体介导,导入C2C12细胞系.[结果]荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP-N1转染的C2C12细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP-N1-CFL2b 的C2C12细胞中荧光主要聚集在细胞质的肌动蛋白丝.表明转染的C2C12细胞系能够高效表达猪CFL2b蛋白,猪CFL2b基因表达的蛋白定位于细胞质中.[结论]该研究为CFL2b基因的功能及该基因与猪肉质性状的相关性的研究奠定了基础.
[目的]瞭解豬CFL2b基因在成肌細胞中的錶達與定位.[方法]用RT-PCR方法擴增得到豬CFL2b基因,連接到T載體上,雙酶切後通過定嚮剋隆將其與真覈錶達載體pEGFP-N1的綠色熒光蛋白基因融閤,構建CFL2b-熒光蛋白融閤基因錶達載體.然後經真覈錶達質粒脂質體介導,導入C2C12細胞繫.[結果]熒光顯微鏡觀察顯示:在空白載體pEGFP-N1轉染的C2C12細胞中熒光佈滿整箇細胞,而在轉染暘性載體pEGFP-N1-CFL2b 的C2C12細胞中熒光主要聚集在細胞質的肌動蛋白絲.錶明轉染的C2C12細胞繫能夠高效錶達豬CFL2b蛋白,豬CFL2b基因錶達的蛋白定位于細胞質中.[結論]該研究為CFL2b基因的功能及該基因與豬肉質性狀的相關性的研究奠定瞭基礎.
[목적]료해저CFL2b기인재성기세포중적표체여정위.[방법]용RT-PCR방법확증득도저CFL2b기인,련접도T재체상,쌍매절후통과정향극륭장기여진핵표체재체pEGFP-N1적록색형광단백기인융합,구건CFL2b-형광단백융합기인표체재체.연후경진핵표체질립지질체개도,도입C2C12세포계.[결과]형광현미경관찰현시:재공백재체pEGFP-N1전염적C2C12세포중형광포만정개세포,이재전염양성재체pEGFP-N1-CFL2b 적C2C12세포중형광주요취집재세포질적기동단백사.표명전염적C2C12세포계능구고효표체저CFL2b단백,저CFL2b기인표체적단백정위우세포질중.[결론]해연구위CFL2b기인적공능급해기인여저육질성상적상관성적연구전정료기출.
