自然科学进展
自然科學進展
자연과학진전
zirankexuejinzhan
2009年
1期
33-38
,共6页
miR396%miR396前体%神经酰胺酶基因%神经酰胺
miR396%miR396前體%神經酰胺酶基因%神經酰胺
miR396%miR396전체%신경선알매기인%신경선알
以拟南芥(Arabidopsis thaliana)miR396小分子为研究对象,分别克隆到了miR396小分子的两个前体(MIR396a,MIR396b),得到转基因植株后,通过Microarray分析、Northern杂交以及遗传学分析的方法探讨了miR396与拟南芥类神经酰胺酶基因的关系.对miR396高表达转基因植株进行Microarray分析的结果表明,拟南芥类神经酰胺酶基因(Atceramidase-likel,Atceramidase-like2)在miR396高表达转基因植株中的表达与空载体转基因植株相比下降2倍以上,而4-alpha-乳糖基神经酰胺半乳糖转移酶则增加2倍以上.Northern杂交结果进一步验证了Microarray分析的结果,即在miR396高表达转基因植株中,拟南芥类神经酰胺酶基因的成员Atceramidase-likel和Atceramidase-like2表达水平均显著降低(分别减少6.8倍和2倍以上),而Atceramidase-like3的表达水平在35S:MIR396a转基因植株叶中有所下降,在35S:MIR396b转基因植株叶中变化不明显.相反地,在35S:MIR396a和35S:MIR396b转基因植株叶中,miR396表达水平分别比空载体转基因植株增加2倍以上.上述研究结果说明拟南芥miR396能有效地负调控CPramidase-likel和Ceramidase-like2等基因的表达水平.
以擬南芥(Arabidopsis thaliana)miR396小分子為研究對象,分彆剋隆到瞭miR396小分子的兩箇前體(MIR396a,MIR396b),得到轉基因植株後,通過Microarray分析、Northern雜交以及遺傳學分析的方法探討瞭miR396與擬南芥類神經酰胺酶基因的關繫.對miR396高錶達轉基因植株進行Microarray分析的結果錶明,擬南芥類神經酰胺酶基因(Atceramidase-likel,Atceramidase-like2)在miR396高錶達轉基因植株中的錶達與空載體轉基因植株相比下降2倍以上,而4-alpha-乳糖基神經酰胺半乳糖轉移酶則增加2倍以上.Northern雜交結果進一步驗證瞭Microarray分析的結果,即在miR396高錶達轉基因植株中,擬南芥類神經酰胺酶基因的成員Atceramidase-likel和Atceramidase-like2錶達水平均顯著降低(分彆減少6.8倍和2倍以上),而Atceramidase-like3的錶達水平在35S:MIR396a轉基因植株葉中有所下降,在35S:MIR396b轉基因植株葉中變化不明顯.相反地,在35S:MIR396a和35S:MIR396b轉基因植株葉中,miR396錶達水平分彆比空載體轉基因植株增加2倍以上.上述研究結果說明擬南芥miR396能有效地負調控CPramidase-likel和Ceramidase-like2等基因的錶達水平.
이의남개(Arabidopsis thaliana)miR396소분자위연구대상,분별극륭도료miR396소분자적량개전체(MIR396a,MIR396b),득도전기인식주후,통과Microarray분석、Northern잡교이급유전학분석적방법탐토료miR396여의남개류신경선알매기인적관계.대miR396고표체전기인식주진행Microarray분석적결과표명,의남개류신경선알매기인(Atceramidase-likel,Atceramidase-like2)재miR396고표체전기인식주중적표체여공재체전기인식주상비하강2배이상,이4-alpha-유당기신경선알반유당전이매칙증가2배이상.Northern잡교결과진일보험증료Microarray분석적결과,즉재miR396고표체전기인식주중,의남개류신경선알매기인적성원Atceramidase-likel화Atceramidase-like2표체수평균현저강저(분별감소6.8배화2배이상),이Atceramidase-like3적표체수평재35S:MIR396a전기인식주협중유소하강,재35S:MIR396b전기인식주협중변화불명현.상반지,재35S:MIR396a화35S:MIR396b전기인식주협중,miR396표체수평분별비공재체전기인식주증가2배이상.상술연구결과설명의남개miR396능유효지부조공CPramidase-likel화Ceramidase-like2등기인적표체수평.
