CAJ | 학술논문

背景与目的:去甲基化作用可能是三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对抗造血系统恶性肿瘤的另一种机制.本研究探讨As2O3对淋巴瘤细胞系T2细胞中抑癌基因酪氨酸磷酸酶(SH2-containinphosphatase-1,SHP-1)的去甲基化作用及对T2细胞生长增殖的生物学影响.方法:T2细胞以As2O3或5-氮杂胞苷(5-aza-2'-deoxyoytidine,5-AC)单独处理,或两药联合处理.采用甲基化特异性PCR、荧光定量PCR和Western检测As2O3处理前后SHP-1基因启动子过甲基化及其mRNA和蛋白表达状况、c-kit蛋白表达变化.MTT法检测细胞存活率.流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:As2O3能逆转SHP-1基因启动子甲基化,使T2细胞SHP-1 mRNA和蛋白重新表达,同时c-kit蛋白表达呈下降趋势;As2O3明显抑制T2细胞的增殖,随浓度增加及作用时间延长,其增殖抑制效应增加(P<0.05);2.5μmol/L浓度的As2O3作用T2细胞t,2,3d细胞增殖抑制率(9.8%,20.3%,47.5%)明显低于联合作用组(11.0%,36.7%.61.0%).As2O3可使T2细胞凋亡率增加,且随作用时间延长和浓度增加,凋亡细胞逐渐增多(P<0.05),联合作用组细胞凋亡率(1 d:17.3%;2 d:37.9%;3 d:67.9%)明显高于2.5 μmol/L As2O3单独作用组(6.1%,26.5%,50.9%).结论:As2O3能去除T2细胞中SHP-1基因甲基化,使其重新表达,并可能通过抑制c-kit受体及其信号转导路径的活化而抑制肿瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡.
배경여목적:거갑기화작용가능시삼양화이신(arsenic trioxide,As2O3)대항조혈계통악성종류적령일충궤제.본연구탐토As2O3대림파류세포계T2세포중억암기인락안산린산매(SH2-containinphosphatase-1,SHP-1)적거갑기화작용급대T2세포생장증식적생물학영향.방법:T2세포이As2O3혹5-담잡포감(5-aza-2'-deoxyoytidine,5-AC)단독처리,혹량약연합처리.채용갑기화특이성PCR、형광정량PCR화Western검측As2O3처리전후SHP-1기인계동자과갑기화급기mRNA화단백표체상황、c-kit단백표체변화.MTT법검측세포존활솔.류식세포술검측세포조망솔.결과:As2O3능역전SHP-1기인계동자갑기화,사T2세포SHP-1 mRNA화단백중신표체,동시c-kit단백표체정하강추세;As2O3명현억제T2세포적증식,수농도증가급작용시간연장,기증식억제효응증가(P<0.05);2.5μmol/L농도적As2O3작용T2세포t,2,3d세포증식억제솔(9.8%,20.3%,47.5%)명현저우연합작용조(11.0%,36.7%.61.0%).As2O3가사T2세포조망솔증가,차수작용시간연장화농도증가,조망세포축점증다(P<0.05),연합작용조세포조망솔(1 d:17.3%;2 d:37.9%;3 d:67.9%)명현고우2.5 μmol/L As2O3단독작용조(6.1%,26.5%,50.9%).결론:As2O3능거제T2세포중SHP-1기인갑기화,사기중신표체,병가능통과억제c-kit수체급기신호전도로경적활화이억제종류세포증식,병유도세포조망.