军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2010年
2期
105-110
,共6页
杨兰兰%鲁丹丹%张玉林%吴小桃%李树%赵海豹%王升启
楊蘭蘭%魯丹丹%張玉林%吳小桃%李樹%趙海豹%王升啟
양란란%로단단%장옥림%오소도%리수%조해표%왕승계
反义寡核苷酸%流感泰得%奥司他韦%偶联%细胞摄取%转染%流式细胞术%正黏病毒科%抗流感病毒活性
反義寡覈苷痠%流感泰得%奧司他韋%偶聯%細胞攝取%轉染%流式細胞術%正黏病毒科%抗流感病毒活性
반의과핵감산%류감태득%오사타위%우련%세포섭취%전염%류식세포술%정점병독과%항류감병독활성
目的 在反义寡核苷酸流感泰得(Flutide, FT)上偶联神经氨酸酶抑制剂奥司他韦,以期通过特定小分子化合物的修饰提高细胞对流感泰得的摄取,进而提高其抗流感的作用.方法 采用3′荧光标记控孔玻璃珠(3′FAM CPG)合成全硫代修饰的流感泰得,并对其5′端进行巯基修饰,与结构改造后的奥司他韦分子进行连接得到流感泰得与奥司他韦偶联物(FTO);修饰前后的反义药物直接转染流感病毒感染的人肺癌上皮A549细胞,通过荧光显微镜观察及流式细胞技术检测FTO与FT的胞内荧光强度来进行反义药物偶联小分子化合物前后胞内摄取量的比较;采用CCK8细胞增殖检测技术进行FT与FTO体外抗流感病毒活性评价.结果 得到一种新的寡核苷酸偶联物FTO;荧光显微镜观察结果显示,细胞给予FTO后荧光强度强于FT;流式细胞检测结果表明,修饰后的FTO胞内平均荧光值明显高于修饰前的FT,其中给药12 h时,病毒感染细胞+FTO(BFTO)组的平均荧光值比病毒感染细胞+FT(BFT)组增加了(102.3±56.0)%,正常细胞+FTO(ZFTO)组的平均荧光值比正常细胞+FT(ZFT)组增加了(89.4±44.7)%;给药24 h后BFTO组的平均荧光值比BFT组增加了(115.2±28.4)%,ZFTO组的平均荧光值比ZFT组增加了(102.9±12.1)%,(P＜0.05);体外抗流感病毒活性评价显示,FTO与FT的IC50值分别为(1.57±0.08)μmol/L与(4.44±0.11)μmol/L.结论 流感泰得采用奥司他韦修饰后有助于提高其在细胞内的摄取量以及抗流感病毒活性.
目的 在反義寡覈苷痠流感泰得(Flutide, FT)上偶聯神經氨痠酶抑製劑奧司他韋,以期通過特定小分子化閤物的脩飾提高細胞對流感泰得的攝取,進而提高其抗流感的作用.方法 採用3′熒光標記控孔玻璃珠(3′FAM CPG)閤成全硫代脩飾的流感泰得,併對其5′耑進行巰基脩飾,與結構改造後的奧司他韋分子進行連接得到流感泰得與奧司他韋偶聯物(FTO);脩飾前後的反義藥物直接轉染流感病毒感染的人肺癌上皮A549細胞,通過熒光顯微鏡觀察及流式細胞技術檢測FTO與FT的胞內熒光彊度來進行反義藥物偶聯小分子化閤物前後胞內攝取量的比較;採用CCK8細胞增殖檢測技術進行FT與FTO體外抗流感病毒活性評價.結果 得到一種新的寡覈苷痠偶聯物FTO;熒光顯微鏡觀察結果顯示,細胞給予FTO後熒光彊度彊于FT;流式細胞檢測結果錶明,脩飾後的FTO胞內平均熒光值明顯高于脩飾前的FT,其中給藥12 h時,病毒感染細胞+FTO(BFTO)組的平均熒光值比病毒感染細胞+FT(BFT)組增加瞭(102.3±56.0)%,正常細胞+FTO(ZFTO)組的平均熒光值比正常細胞+FT(ZFT)組增加瞭(89.4±44.7)%;給藥24 h後BFTO組的平均熒光值比BFT組增加瞭(115.2±28.4)%,ZFTO組的平均熒光值比ZFT組增加瞭(102.9±12.1)%,(P＜0.05);體外抗流感病毒活性評價顯示,FTO與FT的IC50值分彆為(1.57±0.08)μmol/L與(4.44±0.11)μmol/L.結論 流感泰得採用奧司他韋脩飾後有助于提高其在細胞內的攝取量以及抗流感病毒活性.
목적 재반의과핵감산류감태득(Flutide, FT)상우련신경안산매억제제오사타위,이기통과특정소분자화합물적수식제고세포대류감태득적섭취,진이제고기항류감적작용.방법 채용3′형광표기공공파리주(3′FAM CPG)합성전류대수식적류감태득,병대기5′단진행구기수식,여결구개조후적오사타위분자진행련접득도류감태득여오사타위우련물(FTO);수식전후적반의약물직접전염류감병독감염적인폐암상피A549세포,통과형광현미경관찰급류식세포기술검측FTO여FT적포내형광강도래진행반의약물우련소분자화합물전후포내섭취량적비교;채용CCK8세포증식검측기술진행FT여FTO체외항류감병독활성평개.결과 득도일충신적과핵감산우련물FTO;형광현미경관찰결과현시,세포급여FTO후형광강도강우FT;류식세포검측결과표명,수식후적FTO포내평균형광치명현고우수식전적FT,기중급약12 h시,병독감염세포+FTO(BFTO)조적평균형광치비병독감염세포+FT(BFT)조증가료(102.3±56.0)%,정상세포+FTO(ZFTO)조적평균형광치비정상세포+FT(ZFT)조증가료(89.4±44.7)%;급약24 h후BFTO조적평균형광치비BFT조증가료(115.2±28.4)%,ZFTO조적평균형광치비ZFT조증가료(102.9±12.1)%,(P＜0.05);체외항류감병독활성평개현시,FTO여FT적IC50치분별위(1.57±0.08)μmol/L여(4.44±0.11)μmol/L.결론 류감태득채용오사타위수식후유조우제고기재세포내적섭취량이급항류감병독활성.
