科技导报
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과기도보
SCIENCE & TECHNOLOGY REVIEW
2012年
8期
20-24
,共5页
周翠红%王晓奎%周军%毕得%邓小燕
週翠紅%王曉奎%週軍%畢得%鄧小燕
주취홍%왕효규%주군%필득%산소연
S8%Z18%联合用药%坏死%自噬
S8%Z18%聯閤用藥%壞死%自噬
S8%Z18%연합용약%배사%자서
为了探讨S8联合小分子化合物Z18的抗肿瘤效应,本研究通过联合用药方式处理HeLa细胞后,采用台盼蓝染色和流式细胞仪对细胞死亡率和死亡方式进行检测.电镜实验证实Z18诱导细胞自噬,并利用Western Blotting检测联合用药后LC3-Ⅱ的变化和使用转染了GFP-LC3或mRFP-EGFP-LC3的HeLa细胞检测联合用药对细胞自噬和自噬流的影响.最后通过ATG5siRNA和CQ抑制自噬和自噬流,观察联合用药对细胞的自噬和死亡的变化,进一步研究S8对Z18的抗肿瘤作用的影响.结果显示,S8联合用药后,细胞死亡率显著升高(P＜0.05),死亡方式主要以坏死为主.S8明显地促进了Z18对HeLa细胞的毒性,其促进作用具有剂量依赖性.但联合用药并未降低Z18引起的自噬空泡集聚,LC3-Ⅱ蛋白表达也未发生变化.抑制自噬后,并未影响联合用药促进细胞死亡的结果.因此,Z18在联合使用S8的情况下,细胞自噬水平没有发生明显变化,而细胞死亡比例明显升高,自噬并不影响联合用药诱导的细胞死亡.S8可能通过调节细胞坏死的其他途径进而促进细胞对Z18的敏感性,并进一步使细胞发生坏死.
為瞭探討S8聯閤小分子化閤物Z18的抗腫瘤效應,本研究通過聯閤用藥方式處理HeLa細胞後,採用檯盼藍染色和流式細胞儀對細胞死亡率和死亡方式進行檢測.電鏡實驗證實Z18誘導細胞自噬,併利用Western Blotting檢測聯閤用藥後LC3-Ⅱ的變化和使用轉染瞭GFP-LC3或mRFP-EGFP-LC3的HeLa細胞檢測聯閤用藥對細胞自噬和自噬流的影響.最後通過ATG5siRNA和CQ抑製自噬和自噬流,觀察聯閤用藥對細胞的自噬和死亡的變化,進一步研究S8對Z18的抗腫瘤作用的影響.結果顯示,S8聯閤用藥後,細胞死亡率顯著升高(P＜0.05),死亡方式主要以壞死為主.S8明顯地促進瞭Z18對HeLa細胞的毒性,其促進作用具有劑量依賴性.但聯閤用藥併未降低Z18引起的自噬空泡集聚,LC3-Ⅱ蛋白錶達也未髮生變化.抑製自噬後,併未影響聯閤用藥促進細胞死亡的結果.因此,Z18在聯閤使用S8的情況下,細胞自噬水平沒有髮生明顯變化,而細胞死亡比例明顯升高,自噬併不影響聯閤用藥誘導的細胞死亡.S8可能通過調節細胞壞死的其他途徑進而促進細胞對Z18的敏感性,併進一步使細胞髮生壞死.
위료탐토S8연합소분자화합물Z18적항종류효응,본연구통과연합용약방식처리HeLa세포후,채용태반람염색화류식세포의대세포사망솔화사망방식진행검측.전경실험증실Z18유도세포자서,병이용Western Blotting검측연합용약후LC3-Ⅱ적변화화사용전염료GFP-LC3혹mRFP-EGFP-LC3적HeLa세포검측연합용약대세포자서화자서류적영향.최후통과ATG5siRNA화CQ억제자서화자서류,관찰연합용약대세포적자서화사망적변화,진일보연구S8대Z18적항종류작용적영향.결과현시,S8연합용약후,세포사망솔현저승고(P＜0.05),사망방식주요이배사위주.S8명현지촉진료Z18대HeLa세포적독성,기촉진작용구유제량의뢰성.단연합용약병미강저Z18인기적자서공포집취,LC3-Ⅱ단백표체야미발생변화.억제자서후,병미영향연합용약촉진세포사망적결과.인차,Z18재연합사용S8적정황하,세포자서수평몰유발생명현변화,이세포사망비례명현승고,자서병불영향연합용약유도적세포사망.S8가능통과조절세포배사적기타도경진이촉진세포대Z18적민감성,병진일보사세포발생배사.
