CAJ | 학술논문

目的提高CHO细胞表达外源目标蛋白产量.方法用不同浓度的丁酸钠处理重组CHO细胞,观察细胞数量,细胞形态,表达率,表达量的变化.结果当丁酸钠的浓度为1mM,2mM,5mM时,重组细胞的表达量有不同程度的提高.表达率与丁酸钠的浓度有关,也与丁酸钠加入的时间有关.传代24小时加药的细胞,经2mM,5mM丁酸钠处理后,表达量虽比对照组高,但细胞生长情况不好;传代48小时加药的细胞,经5mM丁酸钠处理后,表达量可提高5倍左右,但细胞数大大减少.当细胞长满瓶后(第7天)加入丁酸钠5mM,加药次日的表达量为对照组(不加药组)的9.5倍.细胞数也有所减少.上述实验表明,由于丁酸钠对细胞生长有抑制作用,表达量虽提高,但细胞数减少,不能达到增产的目的.因此我们设计了用正常培液与丁酸钠交替使用的方法,获得了良好的效果.5mM丁酸钠与正常培液交替处理,在加药后7天内所得的表达物产量为对照组的2.1倍.提高了重组CHO细胞表达目标蛋白的产量.结论丁酸钠的合理使用可提高目标蛋白的产量.
목적제고CHO세포표체외원목표단백산량.방법용불동농도적정산납처리중조CHO세포,관찰세포수량,세포형태,표체솔,표체량적변화.결과당정산납적농도위1mM,2mM,5mM시,중조세포적표체량유불동정도적제고.표체솔여정산납적농도유관,야여정산납가입적시간유관.전대24소시가약적세포,경2mM,5mM정산납처리후,표체량수비대조조고,단세포생장정황불호;전대48소시가약적세포,경5mM정산납처리후,표체량가제고5배좌우,단세포수대대감소.당세포장만병후(제7천)가입정산납5mM,가약차일적표체량위대조조(불가약조)적9.5배.세포수야유소감소.상술실험표명,유우정산납대세포생장유억제작용,표체량수제고,단세포수감소,불능체도증산적목적.인차아문설계료용정상배액여정산납교체사용적방법,획득료량호적효과.5mM정산납여정상배액교체처리,재가약후7천내소득적표체물산량위대조조적2.1배.제고료중조CHO세포표체목표단백적산량.결론정산납적합리사용가제고목표단백적산량.