癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2007年
6期
432-435
,共4页
童强松%郑丽端%汤绍涛%阮庆兰%蒋国松%蔡嘉斌%刘媛
童彊鬆%鄭麗耑%湯紹濤%阮慶蘭%蔣國鬆%蔡嘉斌%劉媛
동강송%정려단%탕소도%원경란%장국송%채가빈%류원
除草醚%Ⅱ型肺上皮细胞%增殖%凋亡
除草醚%Ⅱ型肺上皮細胞%增殖%凋亡
제초미%Ⅱ형폐상피세포%증식%조망
背景与目的:除草醚(nitrofen)是一种除草剂,已被广泛用于肺发育不良动物模型的制备.本研究旨在观察除草醚对体外培养的Ⅱ型肺上皮细胞增殖、凋亡活性的影响及其分子机制.材料与方法:分别用20、40、80 μmol/L除草醚处理Ⅱ型肺上皮细胞A549后,采用MTT比色法、集落形成实验检测细胞增殖活性,western blot和实时RT-PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL法及吖啶橙-溴化乙啶荧光染色法观测细胞凋亡情况,western blot检测凋亡相关基因表达.结果:与对照组比较,20、40、80 μmol/L除草醚作用12～48 h后,A549细胞增殖活性降低12.43%～71.73%(P＜0.01),克隆形成能力抑制79.2%(P＜0.01);细胞内PCNA蛋白及mRNA表达水平显著降低,且呈时间和剂量依赖性(P＜0.01);除草醚作用后部分A549细胞发生凋亡形态学改变,凋亡率为8.0%～22.5%(P＜0.01),且不受caspases抑制剂zVAD-fmk的影响,凋亡抑制基因Bcl-xL表达显著下调(P＜0.01).结论:除草醚可能通过分别下调PCNA和Bcl-xL的表达抑制Ⅱ型肺上皮细胞增殖、诱导凋亡.
揹景與目的:除草醚(nitrofen)是一種除草劑,已被廣汎用于肺髮育不良動物模型的製備.本研究旨在觀察除草醚對體外培養的Ⅱ型肺上皮細胞增殖、凋亡活性的影響及其分子機製.材料與方法:分彆用20、40、80 μmol/L除草醚處理Ⅱ型肺上皮細胞A549後,採用MTT比色法、集落形成實驗檢測細胞增殖活性,western blot和實時RT-PCR檢測增殖細胞覈抗原(PCNA)的錶達,TUNEL法及吖啶橙-溴化乙啶熒光染色法觀測細胞凋亡情況,western blot檢測凋亡相關基因錶達.結果:與對照組比較,20、40、80 μmol/L除草醚作用12～48 h後,A549細胞增殖活性降低12.43%～71.73%(P＜0.01),剋隆形成能力抑製79.2%(P＜0.01);細胞內PCNA蛋白及mRNA錶達水平顯著降低,且呈時間和劑量依賴性(P＜0.01);除草醚作用後部分A549細胞髮生凋亡形態學改變,凋亡率為8.0%～22.5%(P＜0.01),且不受caspases抑製劑zVAD-fmk的影響,凋亡抑製基因Bcl-xL錶達顯著下調(P＜0.01).結論:除草醚可能通過分彆下調PCNA和Bcl-xL的錶達抑製Ⅱ型肺上皮細胞增殖、誘導凋亡.
배경여목적:제초미(nitrofen)시일충제초제,이피엄범용우폐발육불량동물모형적제비.본연구지재관찰제초미대체외배양적Ⅱ형폐상피세포증식、조망활성적영향급기분자궤제.재료여방법:분별용20、40、80 μmol/L제초미처리Ⅱ형폐상피세포A549후,채용MTT비색법、집락형성실험검측세포증식활성,western blot화실시RT-PCR검측증식세포핵항원(PCNA)적표체,TUNEL법급아정등-추화을정형광염색법관측세포조망정황,western blot검측조망상관기인표체.결과:여대조조비교,20、40、80 μmol/L제초미작용12～48 h후,A549세포증식활성강저12.43%～71.73%(P＜0.01),극륭형성능력억제79.2%(P＜0.01);세포내PCNA단백급mRNA표체수평현저강저,차정시간화제량의뢰성(P＜0.01);제초미작용후부분A549세포발생조망형태학개변,조망솔위8.0%～22.5%(P＜0.01),차불수caspases억제제zVAD-fmk적영향,조망억제기인Bcl-xL표체현저하조(P＜0.01).결론:제초미가능통과분별하조PCNA화Bcl-xL적표체억제Ⅱ형폐상피세포증식、유도조망.
