细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
6期
626-627,630
,共3页
MACE-A9%真核表达%稳定细胞系
MACE-A9%真覈錶達%穩定細胞繫
MACE-A9%진핵표체%은정세포계
目的:克隆MAGE-A9基因并对其进行真核表达及鉴定.方法:通过逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)从原发性肝癌的细胞中扩增MACE-A9基因片段,将该片段克隆在真核表达载体pEGFP-C3中,转染NIH3T3细胞,经G418筛选,构建稳定表达细胞系,并用荧光显微镜和Western blot对其进行鉴定.结果:经RT-PCR扩增出945 bp基因片段,经测序分析并与GenBank的DNA序列比对分析后,在NIH3T3细胞中表达.G418筛选后,细胞荧光信号较强,Western blot检测,细胞中的融合蛋白能够与抗MACE-A9的多抗结合.结论:成功地扩增了肝细胞肝癌中的MAGE-A9基因全长cDNA并进行真核表达与鉴定.
目的:剋隆MAGE-A9基因併對其進行真覈錶達及鑒定.方法:通過逆轉錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)從原髮性肝癌的細胞中擴增MACE-A9基因片段,將該片段剋隆在真覈錶達載體pEGFP-C3中,轉染NIH3T3細胞,經G418篩選,構建穩定錶達細胞繫,併用熒光顯微鏡和Western blot對其進行鑒定.結果:經RT-PCR擴增齣945 bp基因片段,經測序分析併與GenBank的DNA序列比對分析後,在NIH3T3細胞中錶達.G418篩選後,細胞熒光信號較彊,Western blot檢測,細胞中的融閤蛋白能夠與抗MACE-A9的多抗結閤.結論:成功地擴增瞭肝細胞肝癌中的MAGE-A9基因全長cDNA併進行真覈錶達與鑒定.
목적:극륭MAGE-A9기인병대기진행진핵표체급감정.방법:통과역전록다취매련식반응(RT-PCR)종원발성간암적세포중확증MACE-A9기인편단,장해편단극륭재진핵표체재체pEGFP-C3중,전염NIH3T3세포,경G418사선,구건은정표체세포계,병용형광현미경화Western blot대기진행감정.결과:경RT-PCR확증출945 bp기인편단,경측서분석병여GenBank적DNA서렬비대분석후,재NIH3T3세포중표체.G418사선후,세포형광신호교강,Western blot검측,세포중적융합단백능구여항MACE-A9적다항결합.결론:성공지확증료간세포간암중적MAGE-A9기인전장cDNA병진행진핵표체여감정.
