中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2009年
5期
425-429
,共5页
潘颖%王英坚%刘俊宝%方红娟%张桂珍
潘穎%王英堅%劉俊寶%方紅娟%張桂珍
반영%왕영견%류준보%방홍연%장계진
卵巢肿瘤%RNA%RhoC蛋白%侵袭
卵巢腫瘤%RNA%RhoC蛋白%侵襲
란소종류%RNA%RhoC단백%침습
目的:探讨RNA干扰技术沉默Ras homolgyC(RhoC)对卵巢癌细胞SKOV3细胞运动和侵袭力的影响.方法:利用Invitrogenis RNAi Designer 软件设计并构建RhoC的干扰RNA(miRNA)载体,利用质脂体介导法将RhoC miRNA及非特异miRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,经blasticdin进行稳定筛选出抗性克隆;将实验分为RhoC miRNA组(转染特异miRNA)、非特异miRNA组(转染非特异性miRNA)、空白对照组(不转染RhoC miRNA).Western blot检测3组卵巢癌细胞中RhoC蛋白表达水平;同时检测对卵巢癌细胞体外运动及侵袭的抑制作用.结果:SKOV3细胞稳定转染后,转染特异性miRNA组RhoC蛋白表达量[0.198 9(4 257/21 498)]与转染非特异miRNA组[2.142(38 245/17 855)]和空白对照组[2.604(48 872/18 768)]相比,差异均有统计学意义(P＜0.01),而非特异性组与空白对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05);体外细胞运动实验表明,转染特异性miRNA组与转染非特异性miRNA组及空白对照组跨膜细胞数[分别为(52±3)个、(401±28)个及(432±28)个/高位镜(×200)] 比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),而转染非特异性miRNA组与空白对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05).重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,以上3组穿透基底膜细胞数[分别为(48±9)个、(386±26)个及(424±25)个/高位镜(×200)]比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),而后两组之间无统计学意义(P＞0.05).结论:抑制卵巢癌SKOV3细胞RhoC蛋白的表达对卵巢癌细胞的运动及侵袭有抑制作用,这可能为卵巢癌转移的基因治疗提供新的靶点.
目的:探討RNA榦擾技術沉默Ras homolgyC(RhoC)對卵巢癌細胞SKOV3細胞運動和侵襲力的影響.方法:利用Invitrogenis RNAi Designer 軟件設計併構建RhoC的榦擾RNA(miRNA)載體,利用質脂體介導法將RhoC miRNA及非特異miRNA轉染卵巢癌SKOV3細胞,經blasticdin進行穩定篩選齣抗性剋隆;將實驗分為RhoC miRNA組(轉染特異miRNA)、非特異miRNA組(轉染非特異性miRNA)、空白對照組(不轉染RhoC miRNA).Western blot檢測3組卵巢癌細胞中RhoC蛋白錶達水平;同時檢測對卵巢癌細胞體外運動及侵襲的抑製作用.結果:SKOV3細胞穩定轉染後,轉染特異性miRNA組RhoC蛋白錶達量[0.198 9(4 257/21 498)]與轉染非特異miRNA組[2.142(38 245/17 855)]和空白對照組[2.604(48 872/18 768)]相比,差異均有統計學意義(P＜0.01),而非特異性組與空白對照組之間差異無統計學意義(P＞0.05);體外細胞運動實驗錶明,轉染特異性miRNA組與轉染非特異性miRNA組及空白對照組跨膜細胞數[分彆為(52±3)箇、(401±28)箇及(432±28)箇/高位鏡(×200)] 比較,差異均有統計學意義(P＜0.01),而轉染非特異性miRNA組與空白對照組之間差異無統計學意義(P＞0.05).重組細胞基底膜(Matrigel)侵襲實驗顯示,以上3組穿透基底膜細胞數[分彆為(48±9)箇、(386±26)箇及(424±25)箇/高位鏡(×200)]比較,差異均有統計學意義(P＜0.01),而後兩組之間無統計學意義(P＞0.05).結論:抑製卵巢癌SKOV3細胞RhoC蛋白的錶達對卵巢癌細胞的運動及侵襲有抑製作用,這可能為卵巢癌轉移的基因治療提供新的靶點.
목적:탐토RNA간우기술침묵Ras homolgyC(RhoC)대란소암세포SKOV3세포운동화침습력적영향.방법:이용Invitrogenis RNAi Designer 연건설계병구건RhoC적간우RNA(miRNA)재체,이용질지체개도법장RhoC miRNA급비특이miRNA전염란소암SKOV3세포,경blasticdin진행은정사선출항성극륭;장실험분위RhoC miRNA조(전염특이miRNA)、비특이miRNA조(전염비특이성miRNA)、공백대조조(불전염RhoC miRNA).Western blot검측3조란소암세포중RhoC단백표체수평;동시검측대란소암세포체외운동급침습적억제작용.결과:SKOV3세포은정전염후,전염특이성miRNA조RhoC단백표체량[0.198 9(4 257/21 498)]여전염비특이miRNA조[2.142(38 245/17 855)]화공백대조조[2.604(48 872/18 768)]상비,차이균유통계학의의(P＜0.01),이비특이성조여공백대조조지간차이무통계학의의(P＞0.05);체외세포운동실험표명,전염특이성miRNA조여전염비특이성miRNA조급공백대조조과막세포수[분별위(52±3)개、(401±28)개급(432±28)개/고위경(×200)] 비교,차이균유통계학의의(P＜0.01),이전염비특이성miRNA조여공백대조조지간차이무통계학의의(P＞0.05).중조세포기저막(Matrigel)침습실험현시,이상3조천투기저막세포수[분별위(48±9)개、(386±26)개급(424±25)개/고위경(×200)]비교,차이균유통계학의의(P＜0.01),이후량조지간무통계학의의(P＞0.05).결론:억제란소암SKOV3세포RhoC단백적표체대란소암세포적운동급침습유억제작용,저가능위란소암전이적기인치료제공신적파점.
