潍坊医学院学报
濰坊醫學院學報
유방의학원학보
JOURNAL OF WEIFANG MEDICAL COLLEGE
2010年
5期
321-323,388
,共4页
祝仁军%林志娟%牟东珍%肖伟玲%梁淑娟
祝仁軍%林誌娟%牟東珍%肖偉玲%樑淑娟
축인군%림지연%모동진%초위령%량숙연
IL-32%载体构建%原核表达
IL-32%載體構建%原覈錶達
IL-32%재체구건%원핵표체
目的 构建人IL-32原核表达载体,并进行初步诱导表达.方法 PCR扩增IL-32基因并将其与原核表达质粒pET32a(+)连接,重组pET32a- IL-32经PCR、酶切及测序鉴定后转入表达菌株BL21(DE3)进行融合蛋白的少量诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting检测目的蛋白表达及水平.结果 含有重组质粒的表达菌株经IPTG诱导后获得高效表达,融合蛋白主要存在于包涵体中,重组蛋白表达水平占总蛋白的27.5%;Western Blotting分析表明该蛋白可与特异性抗体发生结合.结论 构建了人IL-32基因的原核表达载体,获得IL-32融合蛋白.
目的 構建人IL-32原覈錶達載體,併進行初步誘導錶達.方法 PCR擴增IL-32基因併將其與原覈錶達質粒pET32a(+)連接,重組pET32a- IL-32經PCR、酶切及測序鑒定後轉入錶達菌株BL21(DE3)進行融閤蛋白的少量誘導錶達,SDS-PAGE和Western Blotting檢測目的蛋白錶達及水平.結果 含有重組質粒的錶達菌株經IPTG誘導後穫得高效錶達,融閤蛋白主要存在于包涵體中,重組蛋白錶達水平佔總蛋白的27.5%;Western Blotting分析錶明該蛋白可與特異性抗體髮生結閤.結論 構建瞭人IL-32基因的原覈錶達載體,穫得IL-32融閤蛋白.
목적 구건인IL-32원핵표체재체,병진행초보유도표체.방법 PCR확증IL-32기인병장기여원핵표체질립pET32a(+)련접,중조pET32a- IL-32경PCR、매절급측서감정후전입표체균주BL21(DE3)진행융합단백적소량유도표체,SDS-PAGE화Western Blotting검측목적단백표체급수평.결과 함유중조질립적표체균주경IPTG유도후획득고효표체,융합단백주요존재우포함체중,중조단백표체수평점총단백적27.5%;Western Blotting분석표명해단백가여특이성항체발생결합.결론 구건료인IL-32기인적원핵표체재체,획득IL-32융합단백.