解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
2期
159-163
,共5页
谭雪锋%田美玲%金国华%秦建兵%朱蕙霞%张蕾%李浩明
譚雪鋒%田美玲%金國華%秦建兵%硃蕙霞%張蕾%李浩明
담설봉%전미령%금국화%진건병%주혜하%장뢰%리호명
核受体相关因子1%神经干细胞%多巴胺能神经元%分化%细胞培养%大鼠
覈受體相關因子1%神經榦細胞%多巴胺能神經元%分化%細胞培養%大鼠
핵수체상관인자1%신경간세포%다파알능신경원%분화%세포배양%대서
目的 探讨核受体相关因子1(Nurr1)基因对大鼠中脑神经干细胞(NSCs)体外诱导分化为多巴胺能神经元的作用.方法通过基因重组技术构建pEGFP-N1-Nurr1真核表达载体,用电穿孔法将重组质粒转染第3代NSCs,用荧光显微镜观察转染效率,免疫印迹法检测基因表达效果;并对转染后的NSCs进行体外分化培养3周,用免疫荧光双标技术检测酪氨酸羟化酶(TH)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达.结果电穿孔法转染NSCs 48h后转染效率达35%,1周后免疫印迹法检测到Nurr1蛋白高表达,约为对照组的5倍;Nurr1基因转染的NSCs分化为TH阳性神经元的比率为15.45%,明显高于对照组,而MAP-2阳性神经元数量与对照组相似.结论 Nurr1基因过表达可以诱导NSCs向TH阳性的多巴胺能神经元分化.
目的 探討覈受體相關因子1(Nurr1)基因對大鼠中腦神經榦細胞(NSCs)體外誘導分化為多巴胺能神經元的作用.方法通過基因重組技術構建pEGFP-N1-Nurr1真覈錶達載體,用電穿孔法將重組質粒轉染第3代NSCs,用熒光顯微鏡觀察轉染效率,免疫印跡法檢測基因錶達效果;併對轉染後的NSCs進行體外分化培養3週,用免疫熒光雙標技術檢測酪氨痠羥化酶(TH)和微管相關蛋白-2(MAP-2)的錶達.結果電穿孔法轉染NSCs 48h後轉染效率達35%,1週後免疫印跡法檢測到Nurr1蛋白高錶達,約為對照組的5倍;Nurr1基因轉染的NSCs分化為TH暘性神經元的比率為15.45%,明顯高于對照組,而MAP-2暘性神經元數量與對照組相似.結論 Nurr1基因過錶達可以誘導NSCs嚮TH暘性的多巴胺能神經元分化.
목적 탐토핵수체상관인자1(Nurr1)기인대대서중뇌신경간세포(NSCs)체외유도분화위다파알능신경원적작용.방법통과기인중조기술구건pEGFP-N1-Nurr1진핵표체재체,용전천공법장중조질립전염제3대NSCs,용형광현미경관찰전염효솔,면역인적법검측기인표체효과;병대전염후적NSCs진행체외분화배양3주,용면역형광쌍표기술검측락안산간화매(TH)화미관상관단백-2(MAP-2)적표체.결과전천공법전염NSCs 48h후전염효솔체35%,1주후면역인적법검측도Nurr1단백고표체,약위대조조적5배;Nurr1기인전염적NSCs분화위TH양성신경원적비솔위15.45%,명현고우대조조,이MAP-2양성신경원수량여대조조상사.결론 Nurr1기인과표체가이유도NSCs향TH양성적다파알능신경원분화.
