中国草食动物科学
中國草食動物科學
중국초식동물과학
China Herbivores
2012年
3期
25-29
,共5页
张秀华%石庆华%赵云程%林嘉鹏%汪立芹%周川%金贤华%黄俊成
張秀華%石慶華%趙雲程%林嘉鵬%汪立芹%週川%金賢華%黃俊成
장수화%석경화%조운정%림가붕%왕립근%주천%금현화%황준성
绵羊类胚胎干细胞%体外培养%多能性调控因子%候选基因
綿羊類胚胎榦細胞%體外培養%多能性調控因子%候選基因
면양류배태간세포%체외배양%다능성조공인자%후선기인
为筛选出更有利于维持绵羊类胚胎干细胞(oESC-like cell)多能性的因子,在基础培养基N2B27/CH中,分别添加PD、PD+hLIF、PD+BPM4、PD+hLIF+BMP4,通过比较分析,初步筛选出了比本实验室原培养体系(N2B27/CH+bFGF)更利于维持oESC-like多能性的培养基添加因子.结果显示:基础培养基中添加PD、PD+hLIF后细胞生长较好,细胞之间的结合更加致密；各种培养基培养物都表达AKP与Sox2、Oct4免疫荧光蛋白等oESC-like多能性标志；4种不同培养基与bFGF相比,细胞的生长速度减慢；在基础培养基N2B27/CH中添加PD和PD+hLIF使多能性候选基因Lin28与c-Myc表达量极显著升高(P＜0.01),Nestin的表达量极显著下调(P＜0.01),加入PD+hLIF使Oct4表达量极显著上调(P＜0.01).因此,在oESC-like基础培养液N2B27/CH的基础上,添加PD或PD+hLIF更有利于oESC-like细胞多能性维持.
為篩選齣更有利于維持綿羊類胚胎榦細胞(oESC-like cell)多能性的因子,在基礎培養基N2B27/CH中,分彆添加PD、PD+hLIF、PD+BPM4、PD+hLIF+BMP4,通過比較分析,初步篩選齣瞭比本實驗室原培養體繫(N2B27/CH+bFGF)更利于維持oESC-like多能性的培養基添加因子.結果顯示:基礎培養基中添加PD、PD+hLIF後細胞生長較好,細胞之間的結閤更加緻密；各種培養基培養物都錶達AKP與Sox2、Oct4免疫熒光蛋白等oESC-like多能性標誌；4種不同培養基與bFGF相比,細胞的生長速度減慢；在基礎培養基N2B27/CH中添加PD和PD+hLIF使多能性候選基因Lin28與c-Myc錶達量極顯著升高(P＜0.01),Nestin的錶達量極顯著下調(P＜0.01),加入PD+hLIF使Oct4錶達量極顯著上調(P＜0.01).因此,在oESC-like基礎培養液N2B27/CH的基礎上,添加PD或PD+hLIF更有利于oESC-like細胞多能性維持.
위사선출경유리우유지면양류배태간세포(oESC-like cell)다능성적인자,재기출배양기N2B27/CH중,분별첨가PD、PD+hLIF、PD+BPM4、PD+hLIF+BMP4,통과비교분석,초보사선출료비본실험실원배양체계(N2B27/CH+bFGF)경리우유지oESC-like다능성적배양기첨가인자.결과현시:기출배양기중첨가PD、PD+hLIF후세포생장교호,세포지간적결합경가치밀；각충배양기배양물도표체AKP여Sox2、Oct4면역형광단백등oESC-like다능성표지；4충불동배양기여bFGF상비,세포적생장속도감만；재기출배양기N2B27/CH중첨가PD화PD+hLIF사다능성후선기인Lin28여c-Myc표체량겁현저승고(P＜0.01),Nestin적표체량겁현저하조(P＜0.01),가입PD+hLIF사Oct4표체량겁현저상조(P＜0.01).인차,재oESC-like기출배양액N2B27/CH적기출상,첨가PD혹PD+hLIF경유리우oESC-like세포다능성유지.
