生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
6期
59-65
,共7页
任伟%徐安凯%徐博%于洪柱%王志锋
任偉%徐安凱%徐博%于洪柱%王誌鋒
임위%서안개%서박%우홍주%왕지봉
朝鲜碱茅%ISSR%单因子试验%体系优化
朝鮮堿茅%ISSR%單因子試驗%體繫優化
조선감모%ISSR%단인자시험%체계우화
为进一步开展朝鲜碱茅种质资源遗传多样性的研究,以野生朝鲜碱茅(Puccinellia chinampoensis)为材料,通过单因子试验对ISSR-PCR反应进行优化.确立最佳的PCR反应体系:在20 μL反应体系中,含有模板DNA 40 ng,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.8 μmol/L,TaqDNA聚合酶1U,MgCl2 2.5 mmol/L和10×PCR Buffer(Mg2+ free)2 μL.此外,还筛选到10条扩增稳定、条带丰富的候选引物,并确定了各自的最佳退火温度.
為進一步開展朝鮮堿茅種質資源遺傳多樣性的研究,以野生朝鮮堿茅(Puccinellia chinampoensis)為材料,通過單因子試驗對ISSR-PCR反應進行優化.確立最佳的PCR反應體繫:在20 μL反應體繫中,含有模闆DNA 40 ng,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.8 μmol/L,TaqDNA聚閤酶1U,MgCl2 2.5 mmol/L和10×PCR Buffer(Mg2+ free)2 μL.此外,還篩選到10條擴增穩定、條帶豐富的候選引物,併確定瞭各自的最佳退火溫度.
위진일보개전조선감모충질자원유전다양성적연구,이야생조선감모(Puccinellia chinampoensis)위재료,통과단인자시험대ISSR-PCR반응진행우화.학립최가적PCR반응체계:재20 μL반응체계중,함유모판DNA 40 ng,dNTPs 0.2 mmol/L,인물0.8 μmol/L,TaqDNA취합매1U,MgCl2 2.5 mmol/L화10×PCR Buffer(Mg2+ free)2 μL.차외,환사선도10조확증은정、조대봉부적후선인물,병학정료각자적최가퇴화온도.