CAJ | 학술논문

目的建立唐氏综合征患者永生细胞系,为唐氏综合征的基因诊断提供标准品.方法采集唐氏综合征患者外周血,采用EB病毒转化外周血B淋巴细胞和加环孢霉素A抑制T淋巴细胞的技术,建立永生淋巴母细胞系.用细胞遗传学方法、实时荧光定量PCR及短串联重复序列(STR)多态性分析技术检测其建系前后的遗传特性及稳定性.结果建系成功,经过传代、冻存和复苏,建系后第10代染色体核型和DNA标志未发生改变.建系前后染色体核型均为47,XX,+21.多重荧光相对定量PCR鉴定,唐氏综合征患者外周血原代细胞和转化后第10代细胞株的△Ct值均在-2.55±3s范围内,与正常对照相比△Ct值范围无重叠.21号染色体上的STR基因座D21S11多态性分析表明,唐氏综合征患者外周血原代细胞和转化后第10代细胞株均有同样的3种基因型.结论染色体核型和DNA分析表明,唐氏综合征患者永生细胞系建立前后遗传特点一致,且稳定,可用作基因诊断试剂盒产品质量检测、质量控制的标准品.
목적 건립당씨종합정환자영생세포계,위당씨종합정적기인진단제공표준품.방법 채집당씨종합정환자외주혈,채용EB병독전화외주혈B림파세포화가배포매소A억제T림파세포적기술,건립영생림파모세포계.용세포유전학방법、실시형광정량PCR급단천련중복서렬(STR)다태성분석기술검측기건계전후적유전특성급은정성.결과 건계성공,경과전대、동존화복소,건계후제10대염색체핵형화DNA표지미발생개변.건계전후염색체핵형균위47,XX,+21.다중형광상대정량PCR감정,당씨종합정환자외주혈원대세포화전화후제10대세포주적△Ct치균재-2.55±3s범위내,여정상대조상비△Ct치범위무중첩.21호염색체상적STR기인좌D21S11다태성분석표명,당씨종합정환자외주혈원대세포화전화후제10대세포주균유동양적3충기인형.결론 염색체핵형화DNA분석표명,당씨종합정환자영생세포계건립전후유전특점일치,차은정,가용작기인진단시제합산품질량검측、질량공제적표준품.